以一溴二4%2c5-氮芴-9-酮合铜(I)为指示剂的DNA电化学生物传感器的研究.pdfVIP

B．031 以一溴‘-4，孓二氮芴．9．酮合铜(I)为指示剂的DNA电化学生物传感器的研究 奎左也’，刘楠，张书圣． DNA电化学生物传感器结合了电化学方法的分析能力和核酸识别过程的特异性，在遗传病的快速 简便诊断、法医学分析、药物筛选等方面的应用发展备受关注n_3．基于电化学方法的DNA生物传感 器因具有使用仪器简单、经济、快速、准确的优点，日益受到科学研究者的重视． DNA与一些具有特殊构型的小分子化合物的作用有非共价结合、共价结合和剪切作用等方式．非 共价结合包括静电结合、插入结合、和沟面结合．多吡啶配体及其衍生物一般含有多个配位原子， 它具有。给电子能力及丌受电子能力，具有良好的分子内电子传递和能量传递性质，能够与多种金 属形成稳定的配合物．多吡啶配体过渡金属配合物与DNA的作用引起了人们极大的兴趣．配合物的形 状、大小、以及中心离子的电荷等都对该作用有一定的影响，其中配合物的形状起着至关重要的作 用。本文以电化学分析方法研究了多吡啶配合物一澳．二4，5一二氮芴-9-酮合铜(I)(分子结构式 见图I，L=4，5一二氮芴-9-酮)和鲱鱼精天然双链DNA(dsDNA)在pH7．9的磷酸缓冲溶液中的相互作用， 并对结合条件进行了优化．建立了一种基于运用HBV基因感应链为探针，Cul【LzBr】为指示剂，玻碳 电极(GCE)可更新使用的DNA电化学生物传感器。 O 图1一溴．二4，5一二氮芴-9-酮合铜(I)的分子结构式 StructuralformularofCu Fig．1 I【(4，5-diazafluorene-9-one)2Br] 配体4，5一二氮芴一9一酮按文献方法合成路1 ． Cu‘[L2Br】按文献方法合成¨1 仪器：CHI 832型电化学分析仪，上海辰华仪器公司；PHS-3D型pH计，上海雷磁仪器厂；三电 极体系：工作电极为玻碳电极(直径3．0mm)，参比电极和对电极分别为饱和甘汞电极(SCE)和铂丝． IIm、0．31．t 1．t m 实验方法：玻碳电极使用前用金相砂纸打磨，然后依次用1．O m和0．054的 a-AI：0，在麂皮上抛光．残余的AI：0，依次用乙醇和蒸馏水超声洗涤2min除去．每次电化学扫描前进 mL0．I 行抛光处理。每个实验至少重复3次，所有的实验数据均为平均值．于2 moL·r1磷酸盐缓冲 溶液中，加入适量的Cul【L：Br】溶液，用上述电化学分析仪记录体系的循环伏安(cv)和微分脉冲伏安 V (DPV)曲线；然后加入不同量鲑鱼精DNA，充分作用后测定相应的曲线．CV扫描电位范围从一0．4 V， V，静止时问2s．DPV起始电位一O．4V，最高电位0．4 到0．4V，扫速为0．1V·s-I，取样间隔0．001 s． V；静止时间2 脉冲幅度0．05V：脉冲宽度0．06S，脉冲周期0．2s，取样间隔0．001 j LqCul【LzBr】，0．1mol·L-磷 Cu‘【L：Br】在裸玻碳电极上的电化学行为：在1．0×10一mol 酸盐缓冲溶液中加入DNA前后分别测量cV图。CV图中可观察到Cul【L2Br】有一对氧化还原峰，其阴极