参黄冲剂对衰老患者P16 基因mRNA 表达及临床疗效与影响.docVIP

参黄冲剂对衰老患者P16基因mRNA表达及临床疗效的影响 韩 旭 李七一 郭宏敏 赖仁胜 艾炳蔚 苑志军 孙云霞 张　彪 尤　峰 屠浩明 江苏省中医院（中国 210029） 中图分类号：R22.34 文献标识码：A 文章编号：1818－0086（2012）01 摘 要：目的 应用基因测序技术，通过观察参黄冲剂对衰老患者P16基因mRNA定量表达等相关内环境指标影响与个体反应差异的相关性，评价参黄冲剂在延缓衰老方面的作用和临床疗效。方法 采用随机、单盲、对照研究方法，共选择60例符合条件的衰老患者纳入研究及统计分析。所有患者被随机分为参黄冲剂治疗组和对照治疗组，每组30人。参黄冲剂组进行常规治疗基础上加用参黄冲剂治疗（江苏省中医院协定处方），每次10ɡ，每日3次。对照组进行常规系统治疗，并给予甲磺酸双氢麦角毒碱片，每次1mg，每日3次。各组均连续服药8周为1个疗程，观察时间为1个疗程。结果 衰老患者肾阴虚、肾阳虚2种证型P16基因的序列特征未见突变改变。参黄冲剂组治疗后衰老患者P16基因mRNA扩增曲线起始循环数（ct值）明显变大（p0.05），对照组治疗后衰老患者P16基因mRNA扩增曲线起始循环数（ct值）无明显差异（p0.05）；参黄冲剂组治疗后肾阴虚、肾阳虚两种证型P16基因mRNA扩增曲线起始循环数（ct值）未见明显差异（p0.05）。参黄冲剂组与对照组在治疗前的衰老患者P16基因mRNA定量表达无统计学意义(p0.05)，二者之间具有可比性；在治疗后两组比较具有统计学意义(p0.05)。两组治疗后衰老患者临床疗效比较，参黄冲剂组30例，显效3例，有效21例，无效6例，总有效率80.0％；对照组30例，显效1例，有效12例，无效17例，总有效率43.3％；经统计学处理，两组间有效率有统计学意义（p0.01）。结论 参黄冲剂治疗老年肾虚患者，可有效改善临床衰老的临床症状，提高日常生活能力；而且参黄冲剂可减少P16基因mRNA的表达，其机制可能是通过抑制衰老细胞的增殖而达到延缓衰老的作用，从而起到抗衰老的作用，但衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚P16基因的序列特征未见突变改变，为进一步诠释中医辨证施治衰老的机制提供了分子生物学的依据。 关键词：P16基因；mRNA定量表达；遗传；参黄冲剂；衰老；辨证论治 随着我国人口老龄化的加快，积极寻找延缓衰老并防治衰老相关疾病的有效手段尤为重要。本研究在以往课题研究基础上，以中医理论为指导，采用遗传药理学方法研究衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚之间的遗传差异，通过P16基因测序和其信使核糖核酸（mRNA）表达来分析衰老主要证型肾阴虚、肾阳虚的基因序列特征，并用参黄冲剂为代表的制剂进行中药治疗干预，探寻机体对中药干预产生的个体反应差异和P16基因mRNA表达等相关内环境指标的相关性，并对参黄冲剂延缓衰老的作用和临床综合疗效进行客观评价，为进一步诠释中医辨证施治衰老的机制提供分子生物学的依据。现将结果报道如下： 1 一般资料 本研究60例受试者均来源于江苏省中医院老年科门诊和病房，男女不限，年龄为60-80周岁，无明显心、脑、肺、肝、肾及内分泌等器质性疾病；采用随机、单盲、对照研究方法进入参黄冲剂治疗组、对照组，每组各30例。 1.1两组性别对比 参黄冲剂治疗组男、女性分别为24人、6人；对照组男、女性分别为26人、4人；两组年龄分布没有显著性差异（p0.05）。 1.2 两组年龄对比 参黄冲剂治疗组年龄最高80岁，最低62岁；对照组年龄最高78岁，最低60岁；两组年龄分布没有显著性差异（p0.05）。 1.3两组证型对比 参黄冲剂治疗组肾阴虚型14例，肾阳虚型16例；对照组肾阴虚型12例，肾阳虚型18例；两组证型分布没有显著性差异（p0.05）。 两组在性别、年龄、证型分布上皆具有可比性。 2 诊断标准和症状量化分级标准 2.1衰老的辨证诊断标准：参照“中医虚证参考标准”[1]制定，分为肾阳虚证、肾阴虚证2个证型。 肾阳虚证: 腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、夜尿频多、下肢浮肿、腰膝酸软、精神萎靡、动则气短，舌质淡，脉弱。 肾阴虚证：头目眩晕、视力模糊、耳鸣或耳聋、腰膝酸软、身疲乏力、烦热汗出、咽干便燥、脱发或发白、失眠健忘、性功能减退、尿后余沥或不禁，齿摇或齿落、肤燥身痒、常易外感、震颤肢麻，舌质红，脉细。 2.2衰老症状量化分级标准：参照“延缓衰老中药的筛选规程和临床观察规范中有关肾虚评分部分”[2]制定。 重度:主动说出或显著、持续出现，为3分；中度:时重时轻，间断出现，为2分；轻度:症状较轻或偶尔出现，为1分；无症状为0分。舌脉中任何一项出现者均为3分。用治疗前后衰老积分值的变化来反映衰老程度的变化。针对衰老症状的严重程度和动态变化分级记分。 3 治疗方案 治疗组：常规治疗基础上