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超声波提取荸荠皮抑菌物质的工艺研究
Study on extraction of antimicrobial substance from eleocharis tuberose peel with ultrasonic
张全军 王泽南 王翠 蒋云舟
ZHANG Quan-jun WANG Ze-nan WANG Cui JIANG Yun-zhou
(合肥工业大学生物与食品工程学院,安徽 合肥 230009)
(School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology, Hefei,Anhui 230009,China)
摘要:对超声波法提取荸荠皮中抑菌物质的工艺进行研究,讨论各单因素对抑菌效果的影响。经正交试验得到的工艺参数为:60目物料、乙醇浓度65%、料液比1:10、超声波提取时间50 min、提取次数1次。此条件下对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为13.3 mm和14.3 mm。
关键词:超声波提取;抑菌物质;荸荠皮;抑菌圈直径
Abstract:The use of ultrasonic-assisted process was investigated for extraction of antimicrobial substance from Eleocharis tuberose peel. The effects of single factors on experimental results were discussed. on the basis of orthogonal test, it was shown that the optimal technological parameters were: material 60 mesh, ethanol 65%, 1:10 for ratio of material to liquid, 30min for ultrasonic time,extraction for one time. the inhibition zone for Escherichia coli and Staphlococcus aureus reached 13.3 mm and 14.3 mm.
Keywords: Ultrasonic extraction;Antimicrobial substance;Eleocharis tuberose peel;Inhibition zone
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基金项目:安徽省教育厅自然科学重点科研项目(项目编号:2006kj062A)
荸荠皮是荸荠加工过程中的废弃物,如果能将这些废弃物加以利用,生产出天然抑菌防腐剂,对增加荸荠附加值将具有积极的意义。已有文献报道采用常规的热回流浸提方法从荸荠皮中提取抑菌物质[4],而超声波提取方法在荸荠皮中的应用未见报道。超声波法作为一种新兴的应用技术,近年来已被广泛地用于天然植物有效成分的提取上。它是利用超声波在液体中发生强烈的空穴作用使细胞破碎,增加其中有效成分的溶出速度和数量,从而提高有效成分的浸提率和缩短浸提时间[5,6]。本试验对超声波提取荸荠皮抑菌物质的工艺条件进行研究。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
荸荠皮:来自于合肥市菜场;
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,由合肥工业大学生物与食品工程学院提供;
牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl5 g,琼脂15~20 g,水1 000 mL,pH7.0~7.2;
乙醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、生理盐水(0.9%NaCl);
KS-150型超声波清洗机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、细菌培养箱、超净工作台、手提式灭菌锅、显微镜、数显恒温水浴锅、数显游标卡尺。
1.2 试验方法
1.2.1 荸荠皮提取物抑菌能力的测定
(1) 菌悬液的制备 取活化后的菌种若干,用适量无菌生理盐水洗入烧杯中,用血球计数法制成含菌量为107~108 CFU/mL的菌悬液。
(2) 待测材料灭菌 将试验用器皿用报纸包好,置高压灭菌锅内121 ℃湿热灭菌20 min。
(3) 滤纸片法测定抑菌圈直径[7] 把滤纸片用打孔器打成直径6 mm的滤纸片,然后灭菌,把灭菌好的滤纸片浸入样品液中4 h,用移液器吸取0.2 mL菌悬液涂平板。将浸泡过的滤纸片取出贴于含菌平板上,每皿3片,以无菌蒸馏水做对照,每菌重复3次,于38 ℃培养16~18 h,用数显游标卡尺测定抑菌圈直径,取平均值。
1.2.2 提取工艺流程
荸荠皮→50 ℃烘干→粉碎→50 ℃水浴下65%乙醇浸泡30
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