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丛枝菌根化大青杨苗木根际微域环境的研究
宋福强1,杨国亭2,孟繁荣2,田兴军1*,董爱荣2
1:南京大学生命科学学院,江苏 南京 210093;2:东北林业大学,黑龙江 哈尔滨 150040
摘要:对接种AM菌根真菌的大青杨苗木根际微区进行系统研究,发现AM菌根真菌对宿主根际微域环境产生了重要影响。试验中选用的Glomus mosseae、G. intraradices、G. sinuosa、G. versiforme等4种AM菌根真菌都与盆栽大青杨苗木形成了菌根复合体。其中G. mosseae、G. intraradices侵染效果最好,侵染率分别是64.4%、67.4%。受两种菌侵染的苗木的生物量分别是对照处理的2.59、2.13倍。AM菌根对根际土壤微生物种群数量没有产生影响,但使根面、根系上的细菌、放线菌、固氮菌的数量显著增加。AM菌根增加了根际土壤磷酸酶、脲酶、蛋白酶的活性,各种酶活性增加量与苗木菌根侵染率呈显著相关。AM菌根使根际pH值降低,与菌根侵染率呈显著负相关。接种苗木的根际土壤中,可直接被植物吸收利用的N、P元素出现富集现象,与菌根侵染率呈极显著相关。
关键词:丛枝菌根;大青杨;根际土壤;微生物;土壤酶活性;酸碱度;土壤养分
中图分类号:S154.36 文献标识码:A 文章编号:1672-2175(2004)02-0211-06树木根际是由树木根(主要是细根)-土壤-微生物和酶组成的特殊微生态系统,亦是各种养分及其它物质进入根系参与生物链物质循环的门户,对树木生长代谢过程起着十分重要的作用。在物理、化学和微生物学特性上树木根际不同于原土体的特殊土壤微区,树木根系和微生物呼吸作用、根系分泌与溢泌质子和有机物质的作用,以及根对养分和水分吸收特性,都决定根际动态的方向和强度[1]。丛枝菌根(AM)对树木的生长有积极的促进作用,这一点已经成为人们共识。但由于人工接种后,AM菌根对树木根际的影响,特别是对根际微生物、土壤酶活性、pH值和养分特性等的影响,还未有过系统的报道。本文以接种AM菌根真菌的盆栽大青杨苗木根际微区为研究对象,对此进行探讨,以便进一步揭示AM菌根真菌对生物群落稳定性的作用。
1 材料与方法
1.1 试验用菌种、苗木种子
供试AM菌根真菌接种体为摩西球囊霉[Glomus mosseae (Nicol.Gerd.) Gerdemann Trappe,简称GM],根内球囊霉(Glomus intraradices Schenck Smith,简称GI),弯丝球囊霉[Glomus sinuosa (Gerde.Bakshi.) Almeida Scherck,简称GS],地表球囊霉[Glomus versiforme (Karsten.) Berch,简称GV],由中国农科院汪洪刚研究员提供。宿主选用大青杨种子培养,用质量分数0.3%高锰酸钾溶液表面消毒。
1.2 试验设计
育苗基质由质量分数60%黄土+25%砂+15%草炭组成,pH 7.25,用体积分数0.1%的甲醛溶液灭菌消毒,土壤与溶液充分拌匀,用塑料布包严,在阳光下爆晒,10 d后即可使用。营养钵用质量分数0.1%高锰酸钾溶液浸泡,1 h后取出立即装土,每一个营养钵装2.0 kg育苗基质,施10 g菌根接种物;每处理重复30盆,以不接种菌根真菌为对照。常规育苗管理,定苗后每营养钵留有2株苗木。
1.3 根际微域土样采集
对供试苗木生长旺盛期(8月中旬)进行取样,主要依据Riley和Barber[2, 3]方法。把植物连同根系从培养的营养钵中取出,人工轻轻抖落下来的土壤于灭过菌的培养皿中视为非根际土壤,松散粘附在根系表面1~4 mm范围内的土壤为根际土,而紧密粘着在根系表面,约距根面0~2 mm的土壤用灭菌的刷子刷下为根面土。把上述取过样的根系浸在干净的水中(换水3~4次),用镊子将根上所有外来的机械混入物除去,然后将植物从皿中取出来,用无菌水冲洗根部。当根上的水流走后,用灼烧过并已冷却的剪刀将根剪成许多3 cm长的小段,放到有滤纸的培养皿中 (有滤纸的培养皿是预先灭菌的),从剪好的根中在灭菌的培养皿中称1.0 g样品用作采集根系微生物样品。
1.4 测定指标和方法
1.4.1 苗木生物量、菌根侵染率
生长季结束后,选定10株标准苗木,测定苗木总干生物量(65 ℃、36 h);随机取鲜根段100~150条,以FAA溶液固定。用Phillip和Hayman[4]的KOH脱色-酸性品红染色法,玻片镜检测定侵染根段数;用下述公式计算侵染率菌根,菌根侵染率(%)=(菌根段数/被检根段数)×100%。
1.4.2 根际、根面、根系微生物数量
采用稀释平板法[5]。真菌用改良PDA;细菌用牛肉膏蛋白胨培养基;放
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