荧光法测定微型生物细胞内ATP技术.pdfVIP

第2 4 卷　第1期 海　　洋　　学　　研　　究 V o l24　N o 1 2 0 0 6 年 3 月　　　　　　　　JO URNAL O F M A R INE SC IENCES　　　　　　　　M ar , 　2006 文章编号: 100 1909 (2006) 0 1007309 X 荧光法测定微型生物细胞内的A T P 的技术 1 1 1 2 张东声 , 王春生 , 杨俊毅 , 叶树明 ( 1 国家海洋局 第二海洋研究所, 国家海洋局 海洋生态系统与生物地球化学重点实验室, 浙江 杭州　3 100 12; 2 浙江大学 生命科学学院, 浙江 杭州　3 10027) 摘　要: A T P 是生物体内的重要化合物, 可用于估算微型生物的生物量, 因此它在生态系统食 物链和能量流动研究中具有重要意义。根据A T P 与荧光素反应产生荧光的原理, 可对微型生物 细胞内的A T P 进行测定。荧光法测定微型生物细胞内A T P 灵敏度高、操作简便快捷。本文从 样品处理、 提取、 测定、干扰因素及应用等几个方面介绍了荧光法测定微生物细胞内 A T P A T P A T P 的技术, 评述了这些技术的优缺点和适用范围, 总结了A T P 提取和测定时可能存在的干 扰因素及其采取的相应对策。 关键词: A T P; 荧光; 微生物 中图分类号: Q 178 53　　　　文献标识码: A 　　微型生物是海洋生态系统的重要组成部分, 估算微型生物的生物量是海洋生态系统食 物链和能量流动研究中一个重要的环节。因为A T P 普遍存在于活的生物体内而在死亡的 生物体内不存在, 而且每一细胞内的A T P 含量大致相同。因此可用A T P 来估算微型生物 [ 1 ] 的生物量 。早在 1968 年, A T P 就被用来检测宇航系统水中的微生物。1970 年H o lm [2 ] 研究了30 种藻类的 含量与生物量之间的关系, 发现 的平均 H an sen A T P b iom a ss C A T P 比值为 250。 [3 ] 在分析大量数据的基础上也得出250 最接近 的实际比 K ar l b iom a ss C A T P 值, 可用于A T P 和b iom a ss C 之间的换算, 该换算可广泛用于生态调查、环境监测、食品 卫生、医疗等领域[4～ 7 ] 。而A T P 含量, 主要是利用A T P 和荧光素反应产生荧光的方法来测 定的。 本文从样品处理、 提取、 测定、干扰因素及在海洋生态学中的应用等几个方 A T P A T P 面介绍了荧光法测定细胞内A T P 技术, 为相关方面的研究工作提供参考。 1　采样及样品预处理 在采样过程中, 包括光、温度、 、压力、湿度等外部条件的改变都会对测定样品的 pH 收稿 日期: ( ) 资金项 目: 国家自然科学基金科学仪器专项资助项 目 4032700 1