玉米秸秆腐解复合菌系YM-1的构建及其降解性能研究.pdfVIP

摘要 本文针对北方玉米秸秆还田地区秸秆降解速度缓慢，从而影响下茬作物生长的状 况，以山东德州、泰安等地玉米秸秆连续多年还田的土壤样品为菌源，筛选具有降解 纤维素能力的菌株，通过菌株间拮抗试验构建复合菌系YM．1，通过液体、固体发酵 试验中菌系的CMC酶活、滤纸酶活、木聚糖酶活和PCR．DGGE监测菌群的动态变 化，评价YM．1的功能及其组成稳定性；最后通过模拟田间试验评价复合菌系YM．1 的应用效果。论文的主要结果如下： 1)采用CMC一刚果红染色法从土壤中分离筛选了15株产纤维素酶菌株，在对其进行 低温诱导试验中发现菌株M11在13℃低温环境下仍能高效分解纤维素，鉴定M1l 为草酸青霉(Penicilliumoxalicum)。发酵试验表明：以玉米秸秆粉为唯一碳氮源，13 ℃、200 r／min摇床发酵培养9d时，纤维素酶活力最高为33．08U／mL。对其酶学性质 初步研究表明该酶最适pH为5．0，最适反应温度为20℃，在5℃～20℃间酶活力 仍能保持在90％以上。 2)根据液体发酵中各菌株纤维素酶活力大小，从上述15株菌中筛选出4株产酶能力 大学资源与环境学院赠送)及实验室保存的具有降解玉米秸秆的复合菌系CSS．1组配 得到新的复合菌系YM．1。 3)采用液体发酵试验研究复合菌系YM．1的产酶能力、结果表明：复合系YM．1在 28℃、200 r／min条件下液体发酵培养7d时CMC酶活力达到最大值29．87U／mL，滤 纸酶活力为17．14U／mL，第9 d时木聚糖酶活力最大为23．6 U／mL，发酵液的pH值 随时间的延长呈先下降后升高的趋势。 活力及木聚糖酶活力，结果表明在复合菌系YM一1腐解过程中，不同代的复合系酶活 变化幅度较小，各代酶活曲线的变化基本相同，都呈现出由低到高再降低的趋势，说 明复合菌系的产酶能力非常稳定。 位置是不同的，菌系中的微生物组成具有多样性。 6)在模拟田间试验中，采用失重率法测定不同处理下玉米秸秆的失重率，结果表明： 对照、复合菌系YM．1、CSS．1及菌剂A处理的秸秆干重都有所降低，对照秸秆失重 说明复合菌系YM．1对玉米秸秆具有较强的降解能力。 h~96 均颜色变化率)来分析腐解微生物的代谢活性，YM．1处理的AWCD曲线在12 h范围内斜率最大，后期168 关键词：低温；复合茵系YM．1；纤维素酶；木聚糖酶；PCR．DGGE Constructionand Characteristics of Microbial Decomposition Analysis Complex YM-1 thecornstalks Systemdecomposing efficiently Candidate：Mu Chunlei andBiochemical Major：Microbial Pharmaceutics Advisors：Zhu Baocheng，Shen Delong Abstract The rateof cornstrawreturnedfieldwasslowundernatural decomposi