马尾藻多糖对鸡脾脏淋巴细胞氧化应激的干预作用研究.pdfVIP

◎ 2009举全国博士生学术会议中国南宁 2009nationalPh．D．CandidatesAcademicConferenceChina Nanning 马尾藻多糖对鸡脾脏淋巴细胞氧化应激的干预作用研究 张玲，陈炳全，帅学宏，胡庭俊’ (广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005) 了马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内GSH和No水平及’淋巴细胞体外增殪的影响。 结果表明。马尾藻多糖得率为15．28％，不含淀粉、氨熬酸和蛋白质；马尾藻多糖能调节鸡脾 脏淋巴细胞内GSH和NO水平，促进淋巴细胞的体外增殖。结果表明马尾藻多糖能提高机体 的抗氧化能力，发挥免疫调节作用。 关键谣：马尾藻多糖；提取：抗氧讫 国内外研究表明，海藻中分离的多糖具有抗肿瘤“’、抗炎脂1、抗病毒口1、抗氧化㈨、提舞 免疫功能协1等多种生物活性，而且毒副作用小№1，有望成为理想的药物来源。我国海藻资源 丰富，加大海藻铡趟开发，对生物制药具有重大的意义。嚣此，我们对广嚣：l￡海枣淫溯岛的 马尾藻进行了提取、分析、体外抗氧化活性研究。 l 材料与方法 1．1材料 马尾藻：采皇广廷奠艺海市澜洲墨，由广弧普医研究所加王钱成玛尾藻粉。 动物：14豳龄健康鸡，购于广西南tj。市某鸡场。 1．2马尾藻多糖的分离提取 采溺醇提法：1009藻粉(100鼙筛)，95％7,醇圈流繇，离心，残渣烘干，予12倍鬟 蒸馏水中，浸泡0．5h，80℃水浴1．5h，离心，取上清，残渣重复水浴1次。两次滤液合并， 浓缩至1膳体积，醇沉过夜。弃去上清液，沉淀离心去乙醇，蒸馏水溶解沉淀，再次醇沉， 过夜。沉淀于冷冻干燥机中干燥，得粗多糖。称重。 精制：称取109粗多糖，配成5％溶液，水浴溶解，3000rlmin离心20min，沉淀重复 溶解1次，两次液体合并，醇沉过夜，沉淀冷冻干燥，得精制多糖。称重。 1．3理化性质 基金项目s围家自然科学基垒项目资助；广西“新世纪十百千人才工裰”专项资金；广西大学科 研基金资助顼要(X071026)。 。 作者简介：张玲(1981．)，女，在读博士生。E-mail：zl·2008-cooi@163．calm 115 ◎ 2009年全国博士生学术会议中国离宁 2009nationalPh．D．CandidatesAcademicConferenceChina Nanning 透过Moli娥反应、碘—映他钾反癍、茚三酮反应检查马尾藻多糖的理傀性质。 1．4鸡脾脏淋巴细胞细胞增殖试验 14口龄健康鸡，无菌取脾脏，Hanks’液洗3次，研磨，200目筛网过滤，制成单细胞悬 液，离心(1000r／rain)，弃主清，Tds-NH4Cl破鳃红缨胞，冰水浴放置lOmin，离心(1000r／min)， 弃上清，Hanks’液洗3次。加入无酚红1640培养液重悬细胞，计数，调整细胞浓度为lxl06。 予96孔细胞培养板培养。 时加入209L 5％C0238．5C细胞培养箱静止培养72h，培养结束前4h加入终浓度0．5mg／mL MTT,209Y礅,， nlTl处 培养结束时吸弃100弘L上清液，加入酸化异丙醇100pL,震荡lOmin，用酶标仪测550 OD值。每组设3个平行。 1．5淋巴细胞氧化应激试验 1．5．1确定H202诱导脾淋巴细胞氧化应激最佳浓度和时间 鸡脾脏淋巴纲脆葱液赣备笼1．4。予24藐细胞培养板培养，加入淋巴纲胞悬液ImU魏。 试验设阴性对照组(I)；过氧化氢组(Ⅱ～Ⅶ)，其中过氧化氢终浓度分别为12．5