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内毒素血症大鼠肠系膜淋巴循环动力学及 iNOS抑制剂SMT作用的实验研究 专 业：解剖 研究生：姚晓 导 师：张立平教授 于桂英教授 f感染性休克，是一种致命性疾病。尽管已确知在感染性休 克中有许多介质参与，但其发生的一系列过程还未得到完全阐 ric 明。最近的文章都集中于讨论过量产生的一氧化氮(nit oxide，NO)可能是感染性休克的病理过程中的重要介质。但 国内外学者多侧重于研究No对血管的作用，对活体淋巴管运 动的生理、病理状态及与NOS的关系报道很少，尤其对内毒素 血症中急性期淋巴微循环的改变及其对病程发展的影响及特 异性iNOS抑制剂对内毒素血症中急性期淋巴微循环的作用尚 未见报道。厂1一 本实验主要研究内毒素、iNOS抑制剂SMT对活体淋巴管运 动的影响，探讨iNOS在急性内毒素血症中对淋巴管运动改变 的作用及iNOS抑制剂对内毒素血症中急性期淋巴微循环的作 用。 } Star大鼠42只。动物用2 f实验选用雄性Wi o％乌拉坦 (7ml／kg体重)肌肉注射麻醉。股部皮肤剪--+口，股静脉插 针静脉滴注无菌生理盐水，每分钟3—8滴；腹正中部开腹，取 出肠系膜，找出一条理想的游离淋巴管，置于观察盒中，保温 (32℃左右)，并定时于肠管上滴加37℃左右的台氏液以维持 一定湿度，在倒置显微镜下观察并利用高分辨率彩色闭路电视 系统，放大320倍条件下录像。实验分三组： A对照组(n=6)：股静脉一次推注生理盐水(5ml／kg体重) 作对照。观察6小时处死。 BLPS组(n=l8)：股静脉一次推注LPS(5mg／kg体重)． 将18只大鼠分成三组，分别在注药后1小时、3小时、6小时 处死。 CLPS+SMT组(n=I 8)：股静脉一次推注LPS(5mg／kg体重) 和SMT(10mg／kg体重)．将18只大鼠分成三组，分别在注药后 1小时、3小时、6小时处死。 将每只观察6小时的动物镜下先稳定5—10分钟，作为正 常录像，再按分组注药，并观察录像6小时后，处死动物，取 血静置，取血清，用硝酸还原酶法测定血清中NO，一／NO?含量。 取肠系膜铺片进行组化、免疫组化染色。 根据录像资料，利 用微机图像处理系统，定淋巴管、定部位测量实验用药前正常 及用药后0．5、1、1．5、2、2．5、3、3．5、4、4．5、5、5．5、6 小时各时段各动物淋巴管平均口径、最大舒张口径、最小收缩 管径、淋巴管收缩频率、淋巴管运动指数、总收缩活性指数、 淋巴管动力学指数。 1 实验结果如下： (1)LPS组的平均管径、最大舒张管径、 最小收缩管径、收缩频率、运动指数均比注药前降低(P0．05)， 组化染色明显加深，免疫组化染色阳性细胞数明显增多 (P0．05)．阳性细胞为巨噬细胞和内皮细胞。血浆NO含量显 7-．L-0．1 7上升到3小时组的 著升高P0．01)，由1小时组的1．1 3。(2)SMT+LPS组的平 2．94±0．37再到6小时组的6．28±0．6 均管径、最大舒张管径、最小收缩管径、收缩频率、运动指数 均比注药前无显著性差异(P0．05)．6小时的组化着色程度要 比LPS组浅。免疫组化染色阳性细胞数比LPS组显著降低 (Po．01)。血囊No含量比LPs组显著降低(Po．01)。 结果说明： 1．正常条件下，肠