Ad-IL24-OSM对CNE-2Z人鼻咽癌细胞及裸鼠移植瘤放疗增敏作用的研究.pdfVIP

呼和清特 第18次全曩干扰豢与细胞茜予学术会议 放疗增敏作用的研究 杨吉成，缪竞诚，盛伟华，韩亚丽，莹莹 (苏州大学医学部细胞与分予生物学教研室江苏苏州215123) 剃浇生，孙麓 (苏州大学附属第一医院耳鼻咽喉科，苏州215000) blot 表述。采霁lCNE-2Z细胞株建蠢人鼻咽癌裸鼠模型，然后按上述各组进行瘤体内局部注 射用药和／或放疗干预．动态测量肿瘤体积，并计算瘤重抑瘤率和Q值：免疫组化检测 达。体内联合组能显著抑裁肿瘤生长，瘤重抑瘸率达78+34％，具放疗增敏协同效应 癌增效作用，其分子机制可能与上调P21、P27、P53等促凋亡因子的表达，下调Bcl一2、 Survivin、Cox．2等凋亡抑制因子的表达有关。 【关键词】白会素24；却瘤素M(OSM)；腺病毒；鼻咽癌：放疗增敏 carcinoma，NPC)是我国高发肿瘸之一，广东、广西、福建、 鼻咽癌(nasopharyngeal 湖南等省为囡内高发区，部分地区高达30／10万--50／10万，调整死亡率分别为6．47／ 万)。男性发病率约为女性的2～3倍，40～50岁为高发年龄组。鼻咽癌的发病率和死 亡率均随年龄增长而上势。鼻咽癌的发生发展是一个多因素作用、多基因参与、多阶 段病变发生的极其复杂的癌变过程，基因治疗作为一种高效性、特异性、靶向性的治 疗手段已是医学界广泛关注的热点，多基因联合可能是根治鼻咽癌的有效手段之一。 近年来研究发现，lL．24和OSM基因对蒡睾瘤细胞具有选择性生长抑制作用和靶商诱导 一67— 呼和涪特 簟18次垒嗣干扰素与绷臆因子学宋会议 2013．8．9-12 凋亡的功能，其分别予细胞内和细胞外不同途径发挥抑癌作用。本文拟采用双启动子 咽癌细胞及裸鼠移植瘤的放疗增敏作用，并对其可能机理进行了探讨，为将来运用 Ad．IL24．OSM进行临床鼻咽癌的基因治疗及其联合低剂量放疗治疗方案的放疗增敏效 果提供实验依据。 1材料与方法 癌细胞CNE-2Z购于南京凯基生物有限公司，细胞培养血清为10％d、牛血清的 各上下游 Tex 弓l物由上海生工生物技术有限公司合成，见表1；小鼠抗人OSM抗体购自Gene 抗小鼠IsG二抗购自abeam公司；PVDF膜购买于苏州阿尔法生物技术有限公司、 Western blot纯学发光试剂盒和暗盒购自主海酱利莱基因技术有限公司；和-6餍龄雄性 BALB／C裸鼠购自中国科学院上海实验动物中心。 弓|物编号及名称 号|物序列 P1：P2l—F CCC(甜bAGCGATGGAAC P2：P21．R A从坝GTCA粥CTGGTCTGC P3：p2誊F P4：P27．R GAAGGCCGGaTTCTTClrrGGGCG p5：Survivin-FTTCTCAAGGACCACCGCATCT P6：Survivin-R TGGCACGGCGCACTTlFC P7：GApDH．FTGATGACATCAAGAAG(订’GGTGAA P8：GApDH．RTCCTrGGAGGCCATGTGGGCC P9：Bcl。2．F TGTGGCC饿WTGAGTTCG P10：Bcl．2．R C1巳～CCCAGCCTCCGTTATCC Pll：IL一24-F GCAC’l℃GAGCCA∞吣r聪睫’CAACAGAGGCT毽CA P12：IL一24．R GCTI℃TAGATCAGAGCT