土壤外源Cd 和Pb 复合污染对小麦(Triticum aestivum L.) 根系植物络合素和谷胱甘肽合成与影响.docVIP

土壤外源Cd和Pb复合污染对小麦（Triticum aestivum L.）根系植物络合素和谷胱甘肽合成的影响 孙琴*，王超 河海大学浅水湖泊综合治理与资源开发教育部重点实验室河海大学环境学院，南京 210098摘要采用盆栽实验研究了土壤外源Cd和Pb复合污染对小麦（Triticum aestivum L.）根系植物络合素（PCs）和谷胱甘肽（GSH）合成的影响。结果表明，土壤外源较高浓度Cd处理（3 mg·kg-1）和高浓度Pb处理（630 mg·kg-1）均抑制了小麦的生长，Cd和Pb复合处理加重了Cd的毒性；Pb处理小麦根内未检出PCs，仅检出GSH，但GSH并没有随Pb处理浓度的增加而增加。随Cd处理浓度（1 mg·kg-1）的增加，小麦根内PCs和GSH含量显著增加；Cd和Pb复合处理增加了小麦根内PCs的合成水平，而降低了GSH的合成水平。回归分析显示, Cd及Cd和Pb复合污染小麦根内PCs的含量与小麦地上部生物量的抑制率保持相当好的线性关系。结果显示，PCs可用于评价土壤环境中Cd及Cd和Pb复合污染的毒性。 关键词镉；铅；复合污染；小麦根系；植物络合素；谷胱甘肽中图分类号：X171.5 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-1833-06植物络合素（phytochelatins, PCs）是一类etallothionein, MT）巯基多肽化合物，又称为植物螯合肽或金属结合体，广泛存在于植物界、藻类、真菌和部分动物体内[1]。大量的生理、生化和遗传学研究证明谷胱甘肽（GSH）是PCs合成的底物，PCs的合成常伴随GSH水平的下降[2-4]。多种金属（如Cd、Zn、Pb、Hg、As等）能够诱导PCs的合成，其合成水平的高低与金属的浓度和存在形态有关。如Ahner等[5]研究发现PC2-4的合成主要取决于Cd2+、Cu2+、Ni2+、Pb2+自由离子的浓度，而不是金属的总浓度，PCs诱导量与进入细胞内的金属离子呈显著正相关。另研究表明，番茄的细胞悬液中加入Cd, 5~15 min即可检测PCs的存在[6]；Sun等[7]研究发现Cd暴露1 d诱导小麦根系和茎中PCs的合成。因此建议PCs作为一种生物标记物（biomarker）衡量环境中重金属污染水平[7-10]。正是由于PCs在生物体内发挥的重要生理作用，近年来PCs一度成为重金属毒害和耐重金属胁迫的研究热点。目前国际上对PCs的研究报道较多，但多侧重于采用溶液培养方式单一重金属暴露下PCs的研究，而实际污染环境中多种重金属往往同时存在，因此有必要加强重金属复合污染下植物体内PCs的响应研究。 d和d或Pb极为少见，因此研究Cd和Pb复合污染对植物的影响，以消除Cd和Pb污染对植物生长的危害，更具有重要的理论和实际意义。有关Cd和Pb复合污染对植物生长的危害，国内外都进行了较为广泛的研究，多集中在探讨重金属的吸收和积累、生长发育、光合、呼吸及品质等方面，而Cd和Pb复合污染对植物体内PCs和GSH合成Sun等[7-9]研究显示重金属胁迫下小麦（Triticum aestivum L.）根系是PCs和GSH合成的主要部位。本文在前期大量研究的基础上[7-9]，进一步以农田作物小麦为试材，采用盆栽土培方式d和Pb复合污染小麦根系PCs和GSH的合成规律，试图为早期诊断环境中Cd、Pb污染提供理论依据。 仪器美国HP1100高效液相色谱系统，包括自动脱气系统（G1322a）、四元泵系统（G1311A）、自动进样系统（G1313A）和HP荧光检测器（1046A）。色谱柱为Vydac C18柱（250 mm×4.6 mm，粒径为5 μm）。美国公司生产的5510E-DTH型超声波清洗器。德国公司生产的5417R型低温离心机。 试剂N-（2-羟乙基）哌嗪-N-3-丙磺酸（HEPPS 99.5%）、谷胱甘肽（GSH 98%）、半胱氨酸（Cys 98%）和三氟乙酸 （TFA 99%）为Sigma产品。衍生试剂monobromobimane （mBBr 95%）、甲磺酸（MSA 99%）和二乙烯三胺五乙酸（DTPA 99%）为Fluka产品。乙腈（ACN，HPLC级）为Lab-Scan产品。PC2、PC3和PC4标准品为美国多肽合成公司产品。实验用水均为Mill-Q水（18.3MΩ）。 土壤和植物盆栽土壤采自江苏省邗江市瓜洲镇无公害农田生产基地的水稻土，土壤样品均采自表层（0~20 cm），新鲜土样室温下风干后，过3 mm尼龙筛用于盆栽试验。进一步细化用于土壤主要理化性状分析，分析方法参考文献[11]。土壤主要的理化性状：土壤pH为6.85，总氮为0.248％，总磷为0.073％，总Cd为0.3 mg·kg-1 DW，