白头翁醇提物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎基质金属蛋白酶-3调控作用的研究.pdfVIP

肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎 肠粘膜屏障保护作用的研究 张文远 姜炜伟 (四川省医学科学院四』lI省人民医院消化内科) 目的：研究肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠粘膜屏障的保护作用。方法： 建立大鼠结肠炎模型。实验分为正常组、模型组和双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌(金 双歧)组。评价疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分，用ELISA法测定结肠组织TNF．Ⅱ、 诱导大鼠结肠炎后，疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分，结肠组织TNF．0【水平升高、 lL．10水平降低和血清内毒素水平升高，而经双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌处理后， 疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分，结肠组织TNF．Ⅱ水平降低、IL．10水平升高和血 清内毒素水平降低；TNBS诱导大鼠结肠炎后，TJ结构遭到破坏，TJ相关蛋白的表达亦减 少，而双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌(金双歧)处理后可使TNBS引起的TJ结构受 损减轻，相关蛋白的表达增多。结论：肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠粘膜屏 障具有明显的保护作用。 白头翁醇提物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎 基质金属蛋白酶．3调控作用的研究 张文远 程卓 (四川省医学科学院四川省人民医院消化内科) 目的：探讨白头翁醇提物对三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonicacid，TNBS)法诱导 大鼠结肠炎的抗炎作用，研究白头翁醇提物对结肠炎大鼠结肠黏膜基质金属蛋白酶一3 (MMP3)基因表达的调控，以期进一步阐明白头翁醇提物治疗大鼠实验性结肠炎的作用机 制。方法：SD大鼠共28只，雌雄兼用，随机数字表法分成白头翁治疗组(n=10)，模型 组(n=10)，正常对照组(n=8)。TNBS法制备大鼠实验性结肠炎模型：所有大鼠禁食24 小时，自由饮水，氯胺酮注射液(50mg／kg)腹腔注射麻醉大鼠后模型组及白头翁治疗组将 旦型盔匡鲎金筮士里盗道垡墨丝瘗瘟鳖渣垡由丝茎查金丛 盈塞垫垩 正常对照组在相同的麻醉条件下予以等量生理盐水注入，注入后立即提起大鼠尾部倒置2～ 3分钟，以防药液倒流。造模后第1～7天，白头翁治疗组大鼠用已制备的白头翁醇提物水 溶液(29／kg．d)2ml灌肠，模型组和正常对照组以等量生理盐水灌肠，每天一次，观察大鼠 精神状态、进食、活动、大便和体重等情况。于造模后第8天断颈处死所有大鼠，游离并 取下整段结肠，沿肠系膜纵向剪开， 用无菌棉签清洁肠内污物，观察结肠标本大体充血水 肿程度，溃疡大小，分布，有无活动性出血等情况；结合常规HE染色进行疾病活动指数(DAI) 和组织学损伤评分；ELISA法测定结肠组织中TNF．晓、IL．10含量；免疫组织化学法检测结 的表达。结果：①一般情况：模型组大鼠造模后24小时开始出现精神差，活动进食减少， 腹泻， 第2～5天腹泻最重，多数出现肉眼血便，5～6天后血便逐渐减轻，食量恢复；白 头翁治疗组大鼠症状较模型组有明显改善，于造模后24小时开始出现大便稀溏或不成形， 血便多表现为隐血阳性，第2～3天腹泻稍重，3～4天后腹泻、血便逐渐减轻，活动逐渐 增多，食量恢复。②疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分：模型组、白头翁治疗组、正 结肠组织TNF．c【、IL．10含量：TNF—Cc含量：白头翁治疗组明显低于模型组，高于正常组。 它们分别是657．54+149．60pg／ml、521．24+109．37pg／ml、205．40+72．49pg／ml；IL-10含量： 白头翁治疗组明显高于模型组，低于正常组，它们分别是42．924-23．74 pg／ml、92．19-±30．09 pg／ml、123，00+36．16pg／ml，组间比较，差异均有显著意义(PO．01～P0．05)。④结肠组织 NF—r,zB p65的表达：白头翁治疗组NF．1cBp65染色积分明显低于模型组，两者均明显高于正 P0．05)。⑤结肠组织MMP3一mRNA的表达：白头翁治疗组明显低于模型组，和正常组几 MMP3．mRNA表达与NF．1(B