农杆菌介导三价融合基因Rirol转化八棱海棠的研究.pdfVIP

维普资讯 果 树 学 报 2007，24(6)：731～736 JournalofFruitScience 农杆菌介导三价融合基因Rirol 转化八棱海棠的研究 王三红 ，杨梦悦 ，顾 敏 ，渠慎春 ，姚泉洪 ，章 镇 (南京农业大学 园艺学院，南京 210095；上海农业科学院农业生物技术 中心 ．上海 201106) 摘 要：研究了以IZl蹄疫病毒 FMDV2A序列融合多基 因在八棱海棠遗传转化上的应用 ．将 DREB， 和rolC融 合三价基因(Riro1)通过农杆菌介导法转化八棱海棠 ，获得 了一批 nptlI抗性植株 ，经报告基因检测 、PCR和Southern 杂交分析证 明融合基因成功导入到八棱海棠中。对转基因八棱海棠相关性状分析表 明．转基因八棱海棠 比对照具有 较强的耐盐性 ，在表型上 ，表现节 间缩短 ，分枝性强 ，侧根发达 ，证明外源融合基因在转基 因植株 中得到表达。试验初 步证明了利用 FMDV2A序列进行多基因转化八棱海棠的可行性，为苹果等果树多基因转化提供 了新 的思路和途 径 。 关键词 ：八棱海棠 ；三价融合基因：农杆菌介导：遗传转化 中图分类号：$661．1 文献标识码 ：A 文章编号：1009—9980(2007)06—731—06 Agrobacterium-—mediatedtransformationofMalusmicromaluswithtriva． 1entgenesRirol WANGSan-hong。，YANGMeng-yue。，GUMin。，QUShen-chun。，YAOQuan—hong，ZHANGZhen。’ (1CollegeofHorticulture，NanjingAgriculturdUniversity，Nanjing，Jiangsu210095China；2ShanghaiKeyLaboratoryofagriculturdCrops’ GenetciandBreeding，A 一biotechnologyResearchCenter，ShnaghaiAcadem3ofAgriculturdScience，Shnahgai201106China) Abstract：DREB．1RTlandrolCgeneswerefusedwithFMDV 2A regionandtransformedtoMalusmicromalusmediatedby Agrobacteriumtumefaciens．Somekanamycin-resistantplantswereobtainedbyselection．Thefusedgeneswereprovedto integratethegenomeofsomeKm-resistantplantsofMalusmicromalusbyGUSstaining，PCR andSouthern bolting．The transgenicplantsshowedhigherresistancetosaltstress，shortenedinternodesandmorebranchingofshootsandroots．Th e studyprimarilyprovedthatco-transfomr ingmultiplegenesfusedbyFMDV 2Aregionmaybeanewwayofintroducingmul— tiplegenesintofruittrees． Keywords：Mdo,micromalus；Trivalentgenes；Agrobacterium—mediated；Transfomr ation 苹果是我国重要的果树之一 ，我国华北 、西北和 DREB (dehydrationresponsiveelementbinding 黄河故道等苹果产区经常干旱缺水 ，土壤盐碱化以 Drotein)属于植物转录因子 ，调节许多下游逆境诱