益肝降脂方药对实验性大鼠酒精性脂肪肝血小板衍生生长因子活力与影响.docVIP

益肝降脂方药对实验性大鼠酒精性脂肪肝血小板衍生生长因子活力的影响 杨彩霞赵远红*贾英杰2 李正2 李小江2顾宏韬3徐雨1 韩素恒1 左晓娜1 李全征1 (1 天津市中医药大学研究生部 2 天津市中医药大学第一附属医院肿瘤科 3 天津市中医药研究院附属医院) 基金项目：天津市应用基础及前沿技术重点项目（编号11JCZDJC１9900） 摘要:目的:观察益肝降脂方药对酒精性脂肪肝病（AFLD）大鼠血小板衍生生长因子(PDGF-BB)活力的影响。方法：SD大鼠85只随机分为模型组25只,中西药组各30只。连续12周予高脂饲喂基础上联合40%、45%、50%梯度酒精灌胃建立AFLD 模型，第9周开始，第1次酒精灌胃半小时后，模型组、中药组、西药组分别灌服生理盐水、中药浸膏、易善复混悬液各2ml,至12周末。于实验第4周末、8周末分别随机抽取模型组大鼠4只、5只，眼眶静脉取血后脱颈处死，余大鼠均于第12周末静脉采血后处死，动态观察各模型组大鼠一般情况、肝脏指数，光镜下肝组织损伤程度，测血清中各项生化指标,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)含量,及大鼠肝组织丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XO）水平、血清血小板衍生生长因子(PDGF-BB)的活性。结果：模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG水平均呈明显上升的趋势，各组间比较显示模型组各生化指标均高于中西药物组（P均0.05）,肝组织中MDA及XO活性在模型组表达最活跃(P0.05)，血小板衍生生长因子活力在模型组最高，HE染色光镜下可观察到各组大鼠肝组织呈不同程度脂肪变性,模型组脂肪变性较其他组明显，病变以中央静脉周围最明显，汇管区有炎性细胞浸润，肝小叶内出现点状坏死，部分肝小叶结构改变，肝细胞索紊乱。PDGF-BB活力高低与肝组织病理变化趋势呈正向相关 结论：采用高脂饮食联合酒精灌胃的方法可成功诱导SD大鼠AFLD模型，益肝降脂方可明显降低AFLD大鼠 血小板生长衍生因子(PDGF)是近年临床开始研究的一种细胞因子,可促使肝星状细胞（HSC）增殖、胶原表达增加,有研究发现,其在参与酒精性肝纤维化中起到重要作用[2],其作用机制可能与降低脂质过氧化、抑制HSC激活转化有关,益肝降脂方药为本课题组自行研制用于治疗AFLD的经验方，是导师总结前人文献结合多年经验取验于临床的处方,多年来临床证实疗效确切，已获成果认证[3]，本研究观察评价中药益肝降脂方对SD大鼠酒精性脂肪肝血小板衍生生长因子活力的影响,验证酒精性肝病早期有效的干预治疗。 1.材料及方法： 1.1材料 1.1.1 动物 SPF级雄性SD大鼠85只，体重（180±20）g，鼠龄5周，由中国人民解放军军事医学科学院提供，合格证：SCXK-（军）2007-004。 1.1.2药物 益肝降脂方药由本院制剂室制成中药浸膏（含生药1.33g (ml-1）；易善复胶囊（批准文号：国药准字，赛诺菲安万特北京制药有限公司产品，去离子水配制成0.005985g (ml-1的易善复混悬液。 1.1.3试剂 HE染料（天津中医药大学病理实验室配制）；AST、ALT、TG及TC测定试剂盒（中生北控201205,201204，201205，201205）；XO、MDA、PDGF测定试剂盒（南京建；高脂饲料（1%胆固醇、10%猪油、0.3%胆酸钠、8%蛋黄粉、80.7%基础饲料）由中国医学科学院放射医学研究所提供；体积分数56%牛栏山二锅头白酒（北京顺鑫农业股份有限公司出产生产，批号：01---75）。 1.1.4主要仪器 半自动生化分析仪（microlab 300,荷兰图威 方法 1.2.1动物模型的建立 85只SPF级成熟SD雄性大鼠饲养于温度18～22℃相对湿度40%~70%、24h持续光照的清洁级动物实验室内。适应性喂养1周后，随机分为模型组25只，中、西药组各30只。参考文献[4]结合预实验[5],采用酒精灌胃法建立酒精性脂肪肝模型。按每周测得体重每天分早晚2次（时间相差8h以上）给予1.5ml/100g酒精灌胃, 酒精体积分数初起为40% (4.8g.kg-1.d-1)并持续至第4周末，后增加酒精体积分数至45%（5.4g.kg-1.d-1）至第8周末,乙醇体积分数加为50%（6.0 g.kg-1.d-1）时维持体积分数不变至实验末（实验持续12周，适应性饲养不计入实验周）。 1.2.2给药情况及采样取材 在酒精性脂肪肝造模基础上，于第9周起，第1次酒精灌胃半小时后，中药组、西药组、模型组分别予中药浸膏2ml（益肝降脂方浓度1.33g/ml）,易善复混悬液2ml(多烯磷酸酯胆碱浓度0.005985g (ml-1),等剂量的生理盐