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安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因工程概述 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.让学生对基因工程这门课有一个整体的了解。 2.了解遗传学的发展史。 3.了解本课程的学习方法。 教学重点 与 难 点 基因工程的诞生、发展、成就和展望是本章的重点。 教 学 过 程 主 要 内 容 与 步 骤 备 注 第一章 基因工程概述 第一节 基因工程的诞生和发展 一、基因 二、 基因工程的诞生 （一）DNA是遗传物质被证实 （二）DNA双螺旋模型的提出 （三）“中心法则”和“操纵子学说”的提出 （四）工具酶的发现和应用 （五）载体的发现及其应用 第二节 基因工程的研究内容 一、基因工程的概念 二、基因工程研究的基本步骤 第三节 基因工程的成就和前景展望 一、成就 二、我国基因工程部分研究进展 授课效果分析 安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因工程的载体 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.了解作为基因工程载体的条件。 2.掌握质粒载体的性质、制备和改造。 3.对一些噬菌体载体有所了解。 教学重点 与 难 点 重点是质粒载体的生物学特性和制备；难点是质粒的改造。 教 学 过 程 主 要 内 容 与 步 骤 备 注 第二章 基因工程的载体和工具酶 第一节 载体 引 言 一、质粒载体 （一）质粒的生物学特性 （二）质粒DNA的制备 1.碱变性法质粒提取的原理 2.碱变性法提取质粒的步骤 （三）质粒载体的改造 1、质粒pBR322 2、pUC质粒载体 二、噬菌体载体 （一）(噬菌体载体 （二）M13噬菌体 （三）柯斯质粒载体 授课效果分析 安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因操作的工具酶 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.掌握限制性内切酶的分类、命名及II型内切酶的性质。 2.掌握重要的连接酶和聚合酶的作用特点。 3.了解基因工程所用的其它酶。 教学重点 与 难 点 重点是各类酶的性质和使用。 教 学 过 程 主 要 内 容 与 步 骤 备 注 第二节 基因操作的工具酶 一、 限制性核酸内切酶及其应用 （一）限制性核酸内切酶的发现 （二）限制性核酸内切酶的分类 （三）限制性核酸内切酶的命名 （四） II型限制性核酸内切酶的基本特性 （五）限制性核酸内切酶的消化反应 二、 DNA连接酶及其应用 （一）DNA连接酶的发现 （二） DNA连接酶作用特点 （三） DNA连接酶的反应条件 （四）T4 DNA连接酶对目的DNA片段和载体连接的一般方案 三、DNA聚合酶及其应用 （一）大肠杆菌DNA聚合酶I （二）Klenow片段酶 （三）T4 DNA聚合酶 （四）逆转录酶（反转录酶） 四、修饰性工具酶 授课效果分析 安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因工程的常规技术（一） 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.掌握琼脂糖凝胶电泳的原理、方法和影响因素。 2.了解分子杂交技术的原理和基本流程。 教学重点 与 难 点 重点是DNA的琼脂糖凝胶电泳检测；难点是分子杂交的原理。 教 学 过 程 主 要 内 容 与 步 骤 备 注 第三章 基因工程的常规技术 第一节 凝胶电泳技术 一、DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 二、琼脂糖凝胶电泳基本原理 三、琼脂糖凝胶电泳的影响因素 分子杂交技术 一、探针与探针标记 1.切口平移标记 2.随机引物标记 二、Southern杂交 三、Northern杂交 四、Western杂交 五、菌落原位杂交 授课效果分析 安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因工程的常规技术（二） 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.掌握PCR的原理和使用方法。 2.了解基因芯片和基因文库构建的基本原理。 教学重点 与 难 点 重点是PCR技术；难点是基因文库构建的原理和方法。 教 学 过 程 主 要 内 容 与 步 骤 备 注 PCR技术 一、PCR技术的基本成分 二、PCR技术的原理和过程 1.PCR反应的温度循环周期 2.20uL反应体系中各成分的母液浓度及加入量 三、荧光定量PCR 标记方法主要有 内插染料 、双标记探针、分子信标等。 荧光定量PCR的优点 生物芯片 一、基因芯片 二、蛋白芯片 基因文库构建 一、基因组文库 二、cDNA 文库的构建 授课效果分析 安徽科技学院生命科学学院基因工程教案 课 题 基因工程的常规技术（三） 课 时 2 教学目的 与 要 求 1.了解酵母