实验三食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）.docVIP

实验五、食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 1、目的与要求 1.1 学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法。 1.2 掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素。 2、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 3、仪器与试剂 3.1 索氏提取器 如图3-3所示。 3.2 电热恒温鼓风干燥箱。 3.3 干燥器。 3.4 恒温水浴箱。 3.5 滤纸筒。 3.6 无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程30℃～60℃） 4、测定步骤 4.1 样品处理 4.1.1 固体样品: 准确称取均匀样品2g～5g（精确至0.01mg），装入滤纸筒内。 4.1.2 液体或半固体: 准确称取均匀样品5g～10g（精确至0.01mg），置于蒸发皿中,加入海砂约20g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然后在95℃～105℃下干燥。研细后全部转入滤纸筒内，用沾有乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 4.2 索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103℃±2℃的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。 4.3 样品测定 4.3.1 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 4.3.2 抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6min～8min回流一次为宜。 4.3.3 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6h～12h，坚果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 4.3.4 提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1～2mL时，在水浴上赶尽残留的溶剂，于95℃～105℃下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过±2mg）。 5、结果计算 5.1 数据记录表 样品的质量m/g 脂肪烧瓶的质量m0/g 脂肪和脂肪烧瓶的质量(m1)(单位：g) 第一次 第二次 第三次 恒重值 5.2 计算公式 X（％）=×100 式中：X—样品中粗脂肪的质量百分数，单位(％)。 m—-样品的质量, 单位(g)； m0 —脂肪烧瓶的质量, 单位(g)； m1 —脂肪和脂肪烧瓶的质量, 单位(g)。 6、注意事项 6.1 抽提剂乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。 6.2 样品滤纸筒的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。 6.3 样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止不饱和的脂肪酸受热氧化而增加质量。 6.4 乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。 6.4.1 检查方法：取5mL乙醚于试管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振摇1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5 g/L淀粉指示剂显蓝色），则该乙醚需处理后使用。 6.4.2 去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙醚。 6.5 反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。 7、思考题 7.1 简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？ 7.2 潮湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么？ 7.3 使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？