尝试对“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的改进.docVIP

尝试对“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的改进 摘要：生物学是一门以试验为基础的自然学科，高中生物学新教材大大增加了实验内容, 意在通过加强实验教学，培养学生的动手能力、科技创新能力以及探索科学知识的方法技巧。但在教学过程中,发现教材中一些实验操作会比较繁琐，需要一定的改进，把一些繁琐的步骤简化，也可以达到相同的效果。试着对“观察DNA和RNA在细胞中的分布”这个实验做了改进，更便于实验教学。 关键词：实验，改进，创新 在人教版高中生物（必修）教材第一册的学生实验“观察DNA和RNA在细胞中的分布”中存在一些问题，如：实验方法比较陈旧，程序烦琐，实验耗时长，实验方法不够具体等问题。笔者通过多次实验，反复验证，对该实验的方法和步骤进行了一些改动，实验效果比较明显，收到了较好的教学效果。 染色原理 由于甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，将甲基绿和吡罗红配成混合染液时，甲基绿多和DNA选择性结合显示蓝绿色，吡罗红和RNA选择性结合显示红色。其原因可能是当配成混合染液时，两种染料同时存在而出现竞争作用：甲基绿与DNA亲和力大,易和聚合程度高的DNA结合，而吡罗红与聚合程度较低的RNA结合。但空间构型不完整的DNA也能与吡罗红结合显示红色。故用该法所得的红色反应来显示RNA的存在并不具有专一性。 染色液的配制 人教版高中生物（必修）教材第一册提到该实验的染色液的配法中提到取吡罗红甲基绿粉1g，但并没有指明吡罗红和甲基绿各取多少，其它的教材上也没有明确提到，因此我是分别取0.5 g。但是在不同的书籍上也提到了不同的配法，例如在汪德耀主编高教版《细胞生物学实验指导》中提到染色液的配制是：甲液：5%Pyronin水溶液 （可加热助溶） 和2%甲基绿水溶液各6ml 。因此，在染色液的配制方法上是没有固定的，只能多次尝试找出最适合的浓度。但是总体来看，本人还是觉得教材上所提到的染色液的配制方法是最适合的。用教材上所提到的方法来配制染色液，实验结果还是不错的，特别是细胞核，是很明显的，颜色也跟教材上的图片一样，绿色。细胞质也比较明显，不过暴露在空气中很快就会变成紫色。而采用人教版《细胞生物学实验指导》中提到的来配制染色液，出来的实验效果也不错，不过细胞核就显示不出绿色而是浅蓝或浅紫色。但是细胞质的效果比较好，而且暴露在空气中不容易变成紫色。可能是因为浓度不同而导致结果不同。在某些学校中可能在配置的过程中缺少某些药品，就用其它的药品代替，这样做出来的效果是很不理想。因此，本人还是觉得严格按照教材上的染色液的配制方法做出来的效果是最理想的。 药品及其配制好的甲液和乙液也必须放在冰箱中保存。因为甲基绿暴露在空气中就很容易被氧化变成甲基紫，而市面上所售卖的药品一般是甲基绿和甲基紫的混合物，因此配制前必须将甲基紫除去。甲基绿溶于水，不溶于氯仿（三氯甲烷）；甲基紫溶于氯仿。利用该特性可用氯仿洗脱甲基紫：将甲基绿水溶液放入分液漏斗，加入氯仿，用力振摇，然后静置，待溶液分层后弃氯仿。如此反复数次，直到氯仿不呈紫色为止。 实验步骤： 在教材上提到的实验步骤操作起来比较烦琐而且所需要的时间比较长。 有一步是需要用到盐酸解离，其实，大学的课本上是没有提到这一步的，但是没有用盐酸解离做出来的效果和有用盐酸解离做出来的效果是一样的。而且假如用盐酸处理需要处理得当才有高中教材中所述作用效果，对于盐酸的浓度，处理的温度和处理的时间必须要有严格的控制。若盐酸浓度过高、处理温度过高、时间过长，结果细胞核不是呈蓝绿色，而是与细胞质一样呈红色。因此在做这个实验时我是省略了用盐酸解离这一步的。 教材上提到的染色时间比较长，约为5分钟，但如果去掉用盐酸解离这一步，染色时间就不用那么长了。由于教材上所采用的染色液浓度比较高，基本上是滴上染色液之后就立刻用吸水纸把染色液吸走，之后就可以观察了，假如染色时间长了整个细胞就会是紫色，整个过程都不需要用蒸馏水冲洗。如果用人教版《细胞生物学实验指导》中提到的来染色液来做这个实验，那么染色时间更长，大约要染色15分钟。 以下是本人的实验步骤： 1．取材：洋葱鳞片叶（洋葱鳞片叶内表皮细胞排列紧密整齐，对于像我们这类的学生来说，初中时候不重视生物的实验操作，因此实验操作能力不强，若用口腔上皮细胞作为材料，则很多学生都不能成功获取，而且也很难分辨出口腔上皮细胞）或者马铃薯茎（取幼嫩部分） 2．用镊子撕取一小块洋葱鳞片叶内表皮，放在已经滴上蒸馏水的载玻片上 3．往材料上滴上一到两滴染色液，之后马上用吸水纸将染色液吸走，盖上盖玻片就可以在显微镜下观察了。在这方面必须很迅速，因为染色后的细胞质暴露在空气中容易变成紫色。 4.在显微镜下观察到的细胞核的颜色就是很明显的绿色，而细胞质也是呈现出红色，但是这个红色会带有一点的紫色。 实验反思