抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒pcDNA3.1TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达1.pdfVIP

维普资讯 蚌埠医学院学报 2006年 9月第31卷第5期 441 [文章编号]1000—2200(2006)05-0441-04 · 基础 医学 · 抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒 pcDNA3．1／TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达 徐胜贵，方 强，孙 新，夏 惠，杨小迪 ，胡守锋，陈兴智，王雪梅 [摘要]tl的：制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清，观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组 核酸疫苗pcDNA3．I／TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达。方珐：用次氯酸钠法孵化六钩蚴，Dot．Blot、ELISA检测兔血 清中特异性抗体及滴度；以pcDNA3．I／TSO45-4B进行体内转染，继之免疫组化法观察其在鼠体骨骼肌的表达。结果：抗六钩 蚴兔血清多克隆抗体制备成功，抗体效价为 1：20100；免疫组化染色后在重组质粒注射部位肌肉组织的肌纤维 内显示阳性的 棕黄色分泌颗粒。结论：重组质粒在小鼠骨骼肌内成功地表达为猪囊尾蚴病多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据 之一。 [关键词]带绦虫；六钩蚴；抗血清；质粒；骨骼肌；表达 [中国图书资料分类法分类号]R383．32 [文献标识码]A Preparationofrabbitseraofanti—Taeniasolium onchosphereandinvivoexpression ofrecombinantplasmidpcDNA3．1／TSO45_4B inskeletalmuscleofvaccinatedmice XUSheng—gui，FANGQiang，SUNXin．XIAHui，YANGXiao—di，HUShou—feng，CHENXing—zhi，WANGXue—mei (DepartmentofMicrobiologyandParasitolog)，BengbuMedicalCollege， AnhuiProvincialKe)LaboratoryofInfectionand Immunit)atBengbuMedicalCollege，Bengbu233030．China) [Abstract]Objective：Toprepareanti—onchosphererabbitseraandobservetheinvivoexpressionofrecombinantplasmidpcDNA3．1／ TSO45-4B containing gene ofstage—specific antigen TSO45-4B ofTaenia solium onchosphere．M ethods：The soluble antigen of onchospherecollectedfromhatchedeggswasinjectedintorabbits，andtheanti—onchosphererabbitserawerecollectedanddetectedby Dot—BlotandELISA．TherecombinantplasmidpcDNA3．I／TSO45-4BwasinjectedintoKunmingmice’Sskeletalmuscleandits expressionwasdetectedbyimmunohistochemistryassay．Results：Th etiterof polyclonalantibodytoantigenofonchosphereinrabbit serumwas1：20l00．Thespecificmasculinebrown—yellowcolorreactionwasseeninthemusclefibersofrecombinantplasmidinjected group．Condusions：ThesuccessfulexpressionofpcDNA3．I／TSO45-4B hasprovided the basisofinvivoexpressionfordeveloping DNAvaccineofrpreventionofcysticercosis．