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- 2017-08-31 发布于安徽
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fib-H 启动子驱动hGM-CSF 在转基因家蚕丝腺中的表达研究∗
李曦 赵越 曹广力 薛仁宇 贡成良
(苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州 215123)
摘 要 为了建立家蚕表达hGM-CSF 的转基因技术体系,我们构建了基于piggyBac 转座子的带有人粒细胞- 巨噬
细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF )和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA GFP-FH-hGM-CSF-IE-neo 。
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将转基因载体导入家蚕进行转基因丝腺工厂表达hGM-CSF 探索,本研究对几种传统的导入方法做了比较,并对新
的更简便的导入方法进行了探索,转基因处理后的家蚕通过G418 和荧光双重筛选,结合PCR 和southern blot 进行
分子生物学鉴定,获得了转基因家蚕,ELISA 检测表明G3 代转基因家蚕丝腺中hGM-CSF 的表达水平为5.149ng/g
冻干组织。
关键词 转基因家蚕、hGM-CSF 、piggy Bac 、GFP、丝腺生物工厂
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