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两水相系统中蛋白质分配系数的测定.doc
两水相系统中蛋白质分配系数的测定
一、实验目的和要求
了解蛋白质在两水相系统中分配系数的测定方法
二、实验原理
1、两水相的形成高聚物与无机盐在水中会形成两个相，如PEG与硫酸盐或碱性磷酸盐，这是由于盐析作用。两种亲水性高聚物在水中会形成两个相，这是由于聚合物的不相容性。但是只有达到一定的浓度时，才能形成两相；两水相形成的定量关系可用相图来表示；相图是研究双水相萃取的基础。
2、两水相系统的优点（1）生物大分子活性物质（蛋白）不易受到破坏；
（2）两相中水分占很大比例；
（3）两水相的相间张力小,相分离过程温和。
（4）两水相之间的传质过程和平衡过程快速，可以实现快速分离；
（5）易于放大
3、在两水相系统中，生物物质与成相组分之间通过疏水键、氢键和离子键等相互作用而不同程度地分配在两相中。
（1）分配系数：当萃取达到平衡时，蛋白质在上、下两相中的浓度之比称为分配系数，
分配系数 K = C上/ C下;
（2）相比：上下相体积比称为相比 R = V上/ V下
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