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不同氮磷浓度对盘星藻生长的影响 陈中兵1，郑广宏1，黄钰铃2 1. 同济大学环境科学与工程学院200092；2. 三峡大学环境工程系443002 摘要：水体富营养化是当前一个严重的环境问题，而营养因子是引起水华的重要元素。文通过实验室配水来模拟在不同氮、磷浓度下盘星藻（Pediastrum sp）的生长情况。共设置了6个氮浓度梯度：0.1、0.5、0.9、1.3、1.7、2.1 mg·L-1对盘星藻的生长影响，在1.7 mg·L-1的氮浓度下盘星藻的相对增长常数Km 0.84。设置6个磷浓度梯度：0.01、0.03、0.07、0.10、0.14、0.19 mg·L-1对盘星藻的生长影响，在0.14 mg·L-1的磷浓度下盘星藻的最大比增长率为μmax 0.83。从水质指标变化看，pH和DO对细胞的生长状况有一定的预先指示作用；浊度与细胞生长状况呈正相关关系，在氮浓度影响下电导率与细胞生长状况呈正相关关系，在磷浓度影响下电导率与细胞生长状况呈负相关关系。 水华；磷；营养因子；盘星藻中图分类号：X1 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-1338-04我国在经济持续高速增长的同时，带来的最大负面效应就是环境污染日益严重，大江大河及湖库水环境质量日趋恶化，国家环保总局在“八五”期间把我国水污染治理重点放在三江、三湖，尤其是对两大淡水湖太湖和滇池的富营养化治理。“九五”期间，国家确立了“33211工程”。面对天然淡水水体富营养化程度日益加剧和水华暴发越来越频繁的局势，如何控制藻类的过量繁殖生长，已成为我国乃至全世界环境科学研究领域的一个难题。有关蓝藻水华大量出现的机理国内外都进行了广泛的研究，认为主要由于营养元素的增多引起其中主要物质是氮和磷[1-2]。赵孟绪等[3]通过对影响蓝藻水华发生的主要因子进行分析发现，汤溪水库蓝藻的生长基本不受氮磷浓度的影响。Vezie等[4]研究表明氮、磷在微囊藻水华的形成过程中起了关键作用。Marinho等[5]研究了不同N/P比对铜绿微囊藻的影响。目前针对蓝藻引起的水华研究较多，而针对绿藻的研究相对较少[67]，本研究以对绿藻研究为重点，揭示绿藻发生水华与营养元素之间的关系。 实验采用藻种为盘星藻561（Pediastrum sp），购自中国科学院水生生物研究所，采用SE培养基培养，培养条件为温度25 ℃，光照时间12 h。 （1）试验藻种：以经镜检计数超过106·mL-1浓度的盘星藻藻液作为实验藻种。 （2）培养条件：在6个水箱（57 cm×38 cm×23 cm）中投3 L香溪河水（用0.45 μm有机玻璃纤维滤膜抽滤过）以及12 L自来水（暴露24 h以去除氯对藻的影响），分别按SE培养基成分（无氮）配置，再以NaNO3为氮源设置6个氮浓度梯度：0.1、0.5、0.9、1.3、1.7、2.1 mg·L-1，均接入达到要求的藻种150 mL。 （1）试验藻种：以经镜检计数超过106 cell·mL-1浓度的盘星藻藻液作为实验藻种。 （2）培养条件：在6个1 L烧杯中分别按SE培养基成分（无磷）配置，再以磷酸二氢钾 KH2PO4 为磷源，设置6个磷浓度梯度：0.01、0.03、0.07、0.10、0.14、0.19 mg·L-1，均接入达到要求的藻种30 mL。 温度、pH、溶解氧、电导率用多参数水质测定仪Multi 340i测定；浊度用浊度仪355IR测定。总磷的测定采用碱性过硫酸钾消解分光光度法 GB11894-89 [8]243，总氮的测定采用钼酸铵分光光度法 GB11893-89 [8]256，叶绿素a的测定用丙酮提取法[8]670-671。 藻类比增长率的计算[9] 1-1 Bt某一时间间隔终结时藻类的现存量；B0某一时间间隔时藻类现存量；t时间间隔 d 。本试验采用铜绿微囊藻叶绿素含量表示其现存量。 相对生长常数[10] 1-2 图2 不同磷浓度下盘星藻生长变化 Fig. 2 The growth change of Pediastrum sp under different concentration of phosphor 式中，K为相对生长常数；x2为对比期终结时藻类的光密度值；x1为对比期开始时藻类的光密度值；t2 - t1为对数期间隔的天数。本试验采用722S分光光度计测出培养液在680 nm（盘星藻的最大吸收波长）处的吸光度做光密度值。 自接种的次日起，隔天的同一时间，取少量藻类培养液在680 nm处用1 cm石英比色皿测其吸光度，利用公式（1-2 计算盘星藻的相对生长常数知1.7 mg·L-1的氮浓度下Km最大为0.84。按陈德辉[11-12]等认为获得比增长率的最大值 μmax 的条件，就是藻类生长