BOD的测定.docVIP

化验中心——水质 五日生化需氧量的测定 稀释与接种法 GB/T 7499-1987 一、定义 生物化学需氧量(BOD)：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。 二、原理 将水注满培养瓶，隔绝空气，将瓶置于恒温条件下培养5天。在培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。 由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧符合规定。 三、试剂和仪器 分析时采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水。 3.1磷酸盐缓冲溶液； 3.2七水硫酸镁溶液； 3.3氯化钙溶液； 3.4氯化铁溶液； 以上溶液贮存在玻璃瓶内，置于暗处；一旦发现有生物滋长现象，弃去不用。 3.5稀释水 取每种盐溶液（1、2、3、4）各1ml，加入约500ml水中，然后稀释至1000ml并混合均匀，将此溶液置于20℃恒温下，曝气1h以上，确保溶解氧浓度不低于8mg/l。此溶液应在8h内使用。 此溶液的五日生化需氧量不得超过0.2mg/l。 3.6盐酸溶液（0.5mol/L） 将40ml（ρ=1.18g/ml）盐酸溶于水，稀释至1000ml。 3.7氢氧化钠溶液（20g/L） 将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000ml。 四、分析步骤 样品需装满并密封于瓶中，放在2-4℃下保存，一般采样后6h之内应进行测定，贮存时间不得超过24h。 4.1样品预处理 4.1.1pH值的控制 如样品中含有游离酸或碱，将会影响微生物活动，应用盐酸溶液（3.6）或氢氧化钠溶液（3.7）调节到pH值7.0-8.0之间。 4.1.2去除游离氯或其他氧化剂 加入硫代硫酸钠溶液使样品中的游离氯或其他氧化剂失效。具体方法是：取100ml污水于碘量瓶中，加入5 mlC(1/2H2SO4)=6mol/l的硫酸，再加入1g碘化钾，摇匀，放暗处静置5min，此时碘被游离，以淀粉作指示剂，用标准硫代硫酸钠溶液滴定，计算所需硫代硫酸钠溶液的量，根据稀释培养用的实际污水量，计算并加入硫代硫酸钠溶液的量。 4.2选择稀释倍数 若样品含溶解氧在6mg/l以上，则无须稀释，可直接测定五天前后的溶解氧，而受污染的地面水、污水或工业废水则应根据其污染程度进行不同倍数的稀释，一般应使经过稀释的样品保持在20℃下，培养五天后，剩余溶解氧至少有1mg/l和消耗的溶解氧至少2mg/l。 稀释倍数也可参照化学需氧量来折算，一般是将污水的CODcr值除以5-15，作3个稀释倍数。 当难于确定适当的稀释比时，可先测定水样的总有机碳(TOC)和重铬酸盐法化学需氧量(CODcr)，根据TOC和COD估计BOD5可能值，再围绕预期的BOD5值，作几种不同的稀释比，最后从所得测定结果中选取合乎要求条件者。 4.3稀释样品 生活污水可用稀释水稀释。根据已决定的稀释倍数，正确计算并量取所需的污水量及稀释水量进行稀释。把经过稀释的样品沿瓶壁缓缓倾入两个编号的生化需氧量瓶内，直至满溢为止。轻敲瓶颈使气泡完全溢出，盖紧瓶塞。再用稀释水灌满瓶口凹处，达到水封。如稀释倍数大于50，先用蒸馏水将原水样稀释10、100或1000倍，再按上述步骤操作。 4.4空白实验 另取两个编号的溶解瓶瓶，倒入稀释水盖紧瓶塞后，一瓶放在20±1℃培养箱内，培养五天后再测定其相应的溶解氧值，一瓶用于测定当天的溶解氧。 4.5将上述各稀释倍数的样品（包括空白）一份测定当天的溶解氧，另一份放在20±1℃培养箱内，培养五天后再测定其相应的溶解氧值。 4.6验证实验 将20ml葡萄糖-谷氨酸标准溶液用接种稀释水（3.5）稀释至1000ml，一份测定当天的溶解氧，另一份放在20±1℃培养箱内，培养五天后再测定其相应的溶解氧值，所得的溶解氧值应为200±37mg/L。 五分析结果 5.1被测定溶液若满足以下条件，则能获得可靠的结果。 培养五天后：剩余DO≥1mg/L；消耗DO≥2mg/L若不能满足以上条件，一般应舍去该结果。 5.2五日生化需氧量BOD5（mg/L）为： BOD5=[（C1—C2）—f1（C3—C4）]/f2 式中： C1——稀释后的样品在培养前的溶解氧，单位mg/L； C2——稀释后的样品在培养5天后的溶解氧，单位mg/L； C3——稀释水在培养前的溶解氧，单位mg/L； C4——稀释水在培养5天后的溶解氧，单位mg/L； f1——稀释水（或接种水）在培养液中所占的比例； f2——样品在培养液中所占的比例。 若样品有几种稀释比所得的结果都符合（5.1）中的条件，则这些结果皆有效，以平均值表示测定结果。 六、测量范围 本方法适用于BOD5大于2mg/L并且不超过6000m