微透析技术在中医药的研究领域应用进展及前景展望.pdfVIP

微透析技术在中医药研究领域的应用进展及前景展望 史丽英，郭义，李桂兰 天津中医药大学，天津（300193 ） E-mail ：shiliying2005@163.com 摘 要：微透析这种微量取样技术已有40 余年的历史，其应用范围涉及到神经生理学、神 经化学、药效学、药代动力学等领域。本文回顾了微透析技术在中医药研究领域的应用进展， 并对其前景进行了展望。 关键词：微透析技术；中医药；应用；进展；展望 1. 微透析简介 [1] 微透析的概念源于 1966 年 Bito 等 “利用透析包从微小的组织间隙取样” 的想法， Delagdo 等[2]将该技术做了改善和精确处理，成功地测定出恒河猴的尾状核和杏仁核中的 monoamine 。从此，微透析技术开始在世界范围内被广泛应用。 微透析的基本原理是扩散，即局部组织间隙中的小分子物质顺浓度梯度透过具有一定截 留分子量的半透膜，扩散入等渗的灌流液中并随导管中的灌流液以一定的速度被收集，用适 当的检测方法对样品进行检测。微透析探针所选用的常用膜材料有再生纤维素、聚丙烯腈、 聚碳酸酯，它们都有很好的生物兼容性和稳定性。微透析探针要比推挽灌流之类的设备要小， 只针对局部微小组织取样，对组织的损伤小；不易改变局部组织的微环境；收集的样品可以 直接用于测定。其不足之处，例如：组织损伤不可避免；样本量少，需要快速、高灵敏度的 检测手段；不能直接反映待测物的浓度；灌流液中低分子物质可扩散到局部组织间隙，其中 [3] 的某些离子可以改变待测物的基础水平 。 反映微透析技术的指标主要是指探针的回收率，包括绝对回收率和相对回收率，绝对回 收率是指一定时间内由灌注液回收的物质总量，相对回收率是指透析液浓度与探针周围基质 、 、 [4 5 6] 浓度的百分比，探针的效率是用相对回收率来表示的。在实验研究过程中，灌流速度 、 、 、 、 灌流液的成分[3 7] 、透析膜的性质[8 9 10]、待测物的性质[11]、温度[12]等都可以影响到回收率。 2. 研究进展 2.1 总体进展 随着微透析技术的不断发展，它已经越来越多的应用于实验及临床研究。应用的组织器 官已经包括脑、皮肤、肌肉、心、肾、肝、眼、子宫、胰腺、黄体、脊髓等；能够检测出的 物质主要有单胺类物质及其代谢产物、氨基酸类物质、肽类物质、能量代谢物及激素类等。 随着药物研究的进一步深入，微透析技术在药代动力学方面的应用也越来越多。 由于通过微透析得到的样品量是以微升来计量的，因此研究者们采用了多种方法来保证 透析液中的待测物质浓度达到检测的要求。如在检测神经肽时，为减少透析系统对其粘附， 有研究者在灌流液中加入牛血清白蛋白[8]或某些抗体[13] ；为防止肽类物质氧化，可在收集管 中加入抑肽酶[14] ；为防止在实验过程中凝血，可用肝素钠注射液对探针透析膜进行处理[15] ； [16] 为避免单胺类物质的氧化，在避光、冰浴等条件下收集可取得较好效果 。 透析液样品的体积小、易挥发，为检测透析液中的待测物质浓度且减少样品在转化过程 中的损失，研究者们通常使用的方法有高效液相色谱[17、18]、毛细管电泳[19]、气相色谱[20]等， 还可以与电化学[21、22] 、荧光学[23、24] 、放射免疫[25]、紫外检测[26]等联用。