微小RNA-144表达对大鼠心肌细胞凋亡影响.pdfVIP

主堡!坠堂篁瘟盘查!Q!!笙垒旦筮塑鲞箜堡塑￡!垫!g!趟丛：△P旦!垫!!：!亟：≥!堕!：兰 ·353· ．基础研究． 微小RNA一144表达对大鼠心肌细胞 凋亡的影响 黄芳黄晓燕 闫东升周希杨德业 【摘要】 目的探讨微小RNA—144(1IIiR．144)对心肌细胞凋亡的影响。方法运用转染的方 法，使大鼠H9c2胚胎心肌细胞中高表达miR．144(fniR-144组)，实时定量PCR确定mjR—144表达上 调后，通过细胞计数试剂盒名(CcK名)、半胱天冬酶(caspase)．3、流式细胞术等方法测定细胞凋亡水 平，观察IIliR·144对细胞凋亡的影响。空白脂质体及随机微小RNA片段作为空白对照及阴性对照。 结果实时定量PCR结果显示，miR一144组lIliR一144的表达(2178．84±838．52)明显高于空白对照 组(1．00±O．00)和阴性对照组(2．06±O．73)(P均O．01)。与阴性对照组和空白对照组比较，IIIiR— 144组细胞增殖明显低、c勰p撇．3活性明显高、细胞凋亡率明显高，而阴性对照组与空白对照组以上 数值比较差异均无统计学意义。结论合成的IlliR—144片段(miR·144milIlic8)能选择性上调miR— 144的表达，并促进心肌细胞凋亡、抑制细胞增殖。 【关键词】肌细胞，心脏；胚胎；微RNAs；细胞凋亡 MicmRNA-144 ov盯-唧r嚣si蚰inducedmyocy0瞄ap0毗osis日蚴ⅣIG几昭。，觑M^B藏∞·，，研，yAⅣ 肋7妒sk增，朋DU舡，yAⅣG眈伊‘脚。砌阳眦矿Cn幽^99y，砌雠够砌‘Bd胁叩豇耐，盹ti￡蹴如r cc盯di鲫∞cn缸r占切如耵＆w．耽，强bnMB妣耐co髓E胛。耽，幽u325DDD．Chi，Ⅺ co嘲PD磁愕口IltIIlDr：M鹏：珧一声，西№以：d哪归昭2∞@J|lD咖口记∞m T0 of H9C2 tlle础ects 【Absn鼍ct】objecti他investigale microRNA—144(miR-144)expressi叫on MiR一144 culnIred (2-1)myocytes．Me山odsw踞up·regIll砒edin面mary H9c2(2一1)myocyt∞througII 胁sfjctioILCells岫gf÷cted itsmixttlrewithmiRNA with“p抵铡ne…2IX)o鲫d 8yIltllesized枷dorIdv 船blank咖nol锄d w鹊co曲nnedreal—time negativec伽trol陀8pectively．Theup·regIllati∞0f面R·144by PCRCeu w聃e砌uated andnow apop‰is by呲哪ofCCK-8，C勰pase-3cytomehy．脚№Real—time in PCRresultsshowed山attlIemiR．1zM仞【pre8sionwasobvi伽slyincreasedmiR—lz珥up-reP=ulation擘即岫p (2178．84±838．52)c伽p锄耐winlnegative(2．06±0．73)狮dbl舳k(1．00士0．oo)contmlg舢p(all 0f w够elevated锄dtlle rat髓were PO．01)．Thepml证br砒i∞w聃lower，tIIe卵ti“tyC鹪pa∞．3 apopb嘴is incn魄sedinl，liR·144 blank s咖墒canny up—reguJati伽g∞upc砌pa捌wimnegative锄dc彻叫