論文名稱(中文)環狀腺核苷單磷酸在腸病毒71型感染模式中的表現.docVIP

論文名稱(中文) 環狀腺核苷單磷酸在腸病毒71型感染模式中的表現 論文名稱(英文) Cyclic adenosine monophosphate expression in enterovirus 71 infection 研究生(中文) HYPERLINK .tw/etdservice/searching?query_word1=林明璋 林明璋 研究生(英文) Ming-Zhang Lin 中文摘要 腸病毒71型是繼小兒麻痺病毒即將被根除之際，目前最具威脅性的微小病毒科病毒，已在亞太各地造成許多大流行，台灣在1998年首次爆發大流行，之後每2-3年流行一次，近年分別在2008以及2012年造成大流行，腸病毒71型感染的症狀以手足口症以及疱疹性咽峽炎是兩種最常見的病症，部分患者會因為腸病毒71型高度的神經侵襲性，導致中樞神經感染引發腦幹腦炎，目前臨床上將腸病毒71型腦幹腦炎的病患分成三個階段: 單純腦幹腦炎、自主神經失調和肺水腫。臨床主要以藥物做為階段性的治療，包括靜脈注射免疫球蛋白對於腸病毒71型自主神經失調以及肺水腫患者，明顯改善自主神經失調以及細胞激素風暴，可避免自主神經失調患者惡化成肺水腫，明顯提升了患者的存活率。2000年後也引入milrinone做為肺水腫治療藥物，milrinone是一種第三型磷酸雙酯酶抑制劑，可增加細胞內環狀腺核苷單磷酸 (cyclic adenosine monophosphate, cAMP) 的濃度，可降低交感神經系統的活性和減少IL-13的產生，同樣也降低白血球以及血小板的數目，臨床試驗也證明milrinone能大幅提升肺水腫患者的存活率，因此我們想了解腸病毒71型感染後對於細胞環狀腺核苷單磷酸的變化以及milrinone是否是藉由提升感染細胞環狀腺核苷單磷酸濃度而改變肺水腫患者細胞激素和免疫細胞的變化。我們以腸病毒71型感染RD細胞，發現隨感染時間的增加，病毒效價會上升且細胞內以及細胞外環狀腺核苷單磷酸濃度會下降，其中以細胞外環狀腺核苷單磷酸濃度降低的幅度最大，此外SK-N-SH、THP-1、Jurkat、HL-60以及hPBMC等細胞株在感染腸病毒71型後也會造成細胞外環狀腺核苷單磷酸下降，若我們在RD細胞感染後先給予免疫球蛋白除了可降低病毒的感染率及病毒效價之外，也可減少病毒所造成細胞外環狀腺核苷單磷酸的下降，我們也嘗試在RD細胞感染後16小時給予milrinone，發現可明顯提升感染細胞外環狀腺核苷單磷酸濃度，卻無法降低病毒的感染率以及病毒效價上升。我們也在動物實驗看到小鼠感染MP4後會導致脾臟、腦幹、脊髓細胞內環狀腺核苷單磷酸濃度下降，且小鼠血清中TNF、IFN-γ以及MCP-1濃度有意義的上升，同時分析小鼠脾臟免疫細胞的分布情況，發現淋巴細胞在感染第六天後明顯的下降，而單核球細胞的則是在第六天時明顯的上升，在感染後第四天給予100 ng/g milrinone治療後有效提升小鼠的存活率，同時改善病毒感染造成的體重下降，對於臨床疾病嚴重度也有統計意義的降低，並提升因病毒感染導致脾臟、腦幹、脊髓細胞內環狀腺核苷單磷酸濃度下降的情況，並且降低IFN-γ以及MCP-1的濃度，milrinone治療後也影響了脾臟免疫細胞的分布，減少了病毒感染導致淋巴細胞的降低，以及降低病毒感染導致單核球上升的情況，綜合上述發現，我們認為在感染腸病毒71型後會造成SK-N-SH、THP-1、Jurkat、HL-60、hPBMC等細胞株以及小鼠脾臟、腦幹、脊髓細胞環狀腺核苷單磷酸的下降，給予milrinone提升細胞環狀腺核苷單磷酸的濃度可降低IFN-γ以及MCP-1的濃度，因此環狀腺核苷單磷酸在腸病毒 71 型感染導致肺水腫之免疫致病機轉上扮演重要的角色。 英文摘要 Enterovirus 71 (EV71) is a neurotropic virus which belongs to the family Picornaviridae. It is one of the notable pathogens in Taiwan since the outbreak in 1998. EV71 infection commonly results in hand-foot-and-mouth disease (HFMD) and herpangina , some cases may progress to severe neurological complications such as brain stem encephalitis (BE). EV71 BE has been categorized into three clinical stages including uncompli