PLGA%2fO-CMC抗癌药物及基因复合功能纳米载体系统构建及评价.pdf

摘要 本文以聚乳酸一乙醇酸共聚物(PLGA)和自行制备的O一羧甲基壳聚糖(0一CMC) 为原料，分别以5一氟尿嘧啶为抗癌药物模型，以反义EGFR为基因药物模型，采 用自身设计的改良复乳法制备了载药和载基因纳米微粒；并在此基础上构建与评 价了同载抗癌药物与基因的复合功能纳米药物载体系统。 各种纳米微粒表征结果显示：(1)以O-CMc和PLGA为原料制得的空载纳米 元素含量为10．3％，具有明显的核壳结构和良好的表面亲水性；(2)以5一氟尿嘧 啶(5-FU)为抗癌药物模型制得的载药纳米微粒平均粒径为98．5rim，粒径分布 的包载率高达18．9％：(3)以反义EGFR为基因药物模型制得的表面吸附加内部 包载基因的纳米微粒平均粒径为375．3nm，粒径分布指数为0．263，‘电位为 一10．67eV。 本文用SEM动态监测各种纳米粒子降解过程中表面形貌的变化，并连续追踪 各种纳米粒子降解过程中的质量损失和降解介质的pl{变化。载5．Fu纳米粒子 具有一级释放特性；(2)在20天内的释药动力学符合零级释放特性。作者创新 构建的表面吸附加内部包载基因的纳米微粒释药动力学方程也具有零级释放动 力学特性。 体外细胞存活率实验和体内动物实验均证实了PLGA／O—CMC纳米粒子有较好 的生物相容性；MTT和细胞凋亡实验结果表明载药纳米粒子和载基因纳米微粒 对TJ905脑胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用；免疫组化实验进一步证实包载基 因的纳米微粒能有效地抑制胶质瘤细胞中EGFR的表达，从而抑制TJ905人脑胶 质瘤细胞的增殖。最后用荧光相差显微镜和共聚焦显微镜动态监测了纳米粒子的 细胞转染过程，发现纳米粒子可在不同时间内进入细胞浆和细胞核。 本文构建的表面吸附基因且内部同时包载5-FU与基因的复合功能纳米微粒 对基因的包载量显著提高，并对肿瘤细胞有较高的抑制率，表明复合功能纳米微 粒中各组分对肿瘤细胞增殖的抑制具有明显的协同作用。 关键词：O一羧甲基壳聚糖；聚乳酸一乙醇酸共聚物；改良复乳法；纳米微粒 抗癌药物；基因治疗；缓释 ABSTRACT cDNA were antisense．EGFRloaded 5．fluorouracilf5．F∽and Nanoparticles W／O／Wmethod acid) byimproved usingPoly(D，L—lactide—CO—glycolic prepared chitosan totheirattractive fPLGA)andO-carboxymethylfO-CMC)due degradation and this delivery can physicochemicalproperties，andmultiple—functionalsystem realizethecombinatione靛ctofanticancerand inthe ofdiseases． druggene t11erapy Theresultsof allkindsof showed characterizing nanoparticlesthat：r1)the mean andthecontentofNelementof size，polydispersity，Zetapotential 0一CMC—coatedPLGANPswithoutis and drug222．9nm，0．109