低pH毛细管区带电泳法分离寡核苷酸和硫代反义寡核苷酸.pdfVIP

!# 年 $ 月 色 谱 ’()* !% +(* $ !#$% !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 $ $ $’ 低! 毛细管区带电泳法分离寡核苷酸和硫代反义寡核苷酸 $ $ ! $ 李* 茜 ，* 陈* 蓉 ，* 孙毓庆 ，* 胡育筑 （$* 中国药科大学分析化学教研室，江苏 南京 ! $,) ；! * 沈阳药科大学药学院，辽宁 沈阳$$ $’ ） 摘要：在低78 条件下采用毛细管区带电泳法对寡核苷酸（9:- :;+ ）及具有药用价值的硫代反义寡核苷酸（9=- :;+ ）药物“癌泰得”系列样品（$) ! .4% ）进行分离，并系统考察优化了缓冲溶液的78 、缓冲溶液的种类及浓 度、添加剂的种类及浓度、电压、温度等因素对样品单碱基分离的影响。其中缓冲溶液的78 对分离起决定性的作 用，而添加剂尿素的加入显著提高了9=- :;+ 样品的分离度。结果表明，采用未涂层弹性石英毛细管（% !. ，总 长-./ 2. ，有效长度-/ # 2. ），以% ..() ? 磷酸二氢钠- 磷酸（78 !/ !- ）-# .() ? 尿素为缓冲溶液，压力进样 （! @9 0 $ ），负极进样，正极检测，在分离电压 1 ! @’ 、柱温!% A 、检测波长!’ #. 条件下，可实现寡核苷酸及 硫代反义寡核苷酸混合样品的单碱基分离。9:- :;+ 的$) $. .4% 及 $. ! .4% 样品的平均分离度分别为 -/ ’) ，,/ ! ；9=- :;+ 的$) $. .4% 及 $. ! .4% 样品的平均分离度分别为$/ !, 及/ ) $ 。该法操作简单，重现 性好，可为反义寡核苷酸药物的分析提供借鉴。 关键词：低78 ；毛细管区带电泳法；寡核苷酸；硫代反义寡核苷酸 :’%)* * 文献标识码：B* * 文章编号：$-)# $, （!# ） $- $ $-’* * 栏目类别：研究论文 中图分类号： #$!%%’()* )+ ,-).!-)/($.’$ 01(2)/$)34*561$)’(/$. %*/ ,-).!-))’-()%’$ 7*’(.$*.$ 01(2)/$)34*561$)’(/$. 84 9%!(11%4 :)*$ ;1$6’)!-)$.(. %’ )= ! ?C D/# $ ，E8,+ F(#G $ ，=H+ I$0/#G! ，8H I$61$ $ （!! #$ % ’( #) ’ *+ , )%-.’/0%- 12#(/3 ’. ，12/)% 4 2%( %0#5 ’/0%- 6)/7#3/’. ，8 %)9 /): !##$% ，12/)% ； ! ;02**- *+ 4 2%( %0. ，;2#).%): 4 2%( %0#5 ’/0%- 6)/7#3/’. ，;2#).%): !!##! ，12/)% ） 78.’%6’ ：:)/G(J4(K#$2)4(L/J4 （:;+ ）. 7(4 M/()(G/2) 2L/N/L /) 7/7* ，#J %4 $4J O(% L14 2#24% L14%74$/* =#L14/64J :;+ 2(#L/# .# M-7%(J$2L ，#J ( L1