人血清中总前列腺特异性抗原化学发光免疫分析法的建立.pdfVIP

46 现代检验医学杂志 第 25卷 第 1期 2010年 1月 JModLabMed，Vo1．25，No．1，Junua．2010 人血清中总前列腺特异性抗原化学发光免疫分析法的建立 王雅果 ，王 缦 ，彭 波。 (1．华东理工大学生物化学与分子生物学系，上海 200237； 2．上海科华生物工程股份有限公司，上海 200233) 摘 要：目的 建立一种定量分析人血清 中总前列腺特异性抗原 (t—PSA)的化学发光免疫分析方法。方法 采用生物素和 碱性磷酸酶分别标记捕获抗体与检测抗体，与样本中的抗原形成免疫复合物，然后通过链霉亲和素与生物素的反应被链霉 亲和素标记的磁微粒捕获，利用碱性磷酸酶与发光底物的反应建立了双单抗夹心法检测人血清中t—PSA的化学发光免疫 分析方法。结果 标准品对WHO96／670国际标准品进行溯源，同时检测血清样本，线性回归方程为y=0．9434 一0．160 5，相关系数r=0．99。选择具有等摩尔分子反应性的单抗，对不同存在形式的PSA检测偏差在士3 以内。病人血清样本 的测试结果与雅培architecti2000化学发光试剂盒检测结果显著相关，相关系数r=0．989。结论 该方法具有较高的灵敏 度和重复性，检测结果准确 ，提高了国产同类试剂的竞争力，同时比同类进 口试剂成本低 ，适于临床检测和科研应用。 关键词：总前列腺特异性抗原(t—PSA)；等摩尔分子反应；PSAWHO 国际标准品；溯源性；化学发光免疫 分析法 中图分类号：R392．11 文献标志码：A 文章编号：1671—7414(2010)01—046—03 doi：10．3969／j．issn．1671—7414．2010．01．014 EstablishmentofChemiluminescentImmunoassayforM easurements ofTotal—ProstateSpecificAntigen inHumanSerum W ANG Ya—guo ，W ANG Man。，PENG Bo。 (1．BiochemistryandMolecularBiology， EastChinaUniversityofScienceandTechnology，Shanghai200237，China； 2．ShanghaiKehuaBio—engineeringCo．Ltd，Shanghai200233，China) Abstract：Objective Toestablishchemiluminescentimmunoassayforthequantitativemeasurementoftotalprostatespe— cifieantigen (t—PSA)inthehumanserum．Methods Theimmunoassayutilizedbiotinwhichcouldreactwithstreptavidin linkedwithmagbeadstolabelwithcaptureantibodyandusedalkalinephosphotaseasthelabeledenzyme，tobewiththe antigeninsample，itcouldform theimmuno—complex．Throughthereactionbetweenbiotinandstreptavidin，thecomplex wasfixedon themagbeads．Thesubstratewouldreactwithalkalinephosphotaseand thedoublesandwichchem ilumi— nescentimmunoassaywasestablished．Results TracetoWH0 96／670referencematerials，in—housestandardmaterialshad beenestablished．theresultsofserum correlatedwellwithWH096／670，withlinearityequationy=0．9434 —O．16O5． correlationcoefficientwas0．99．Thepairedmonoclonalantibodywithequimolarcharacteristicswasselected，thedet