板栗脂质转运蛋白基因克隆及表达.pdfVIP

第! 卷 第! 期 林 业 科 学 ./01 ! ，*/1 ! # $ % $ 年 ! 月 ’()*+(, (-.,) (*(’,) ,23 4 ，# $ % $ 板栗脂质转运蛋白基因的克隆及表达 % # % # % % 唐5 征 5 杨5 凯 5 冯永庆 5 曹庆芹 5 沈元月 5 秦5 岭 （%1 北京农学院植物科学技术学院5 北京 %$##$ ；#1 北京农学院生物技术系5 北京 %$##$ ） 摘5 要：5 利用 6,’) 技术从板栗短雄花序突变体中扩增得到 $ 72 的板栗脂质转运蛋白（08289 :3;=?3 23/:?8 ， -+@ ）AB*, 片段。该 AB*, 编码 %%C 个氨基酸，具有 C 个位置保守的半胱氨酸（’ ）残基及 # 个氨基酸的信号肽， 它与棉花、草莓脂质转运蛋白氨基酸序列相似性为 D E ，基因序列已提交数据库（F?G;H ），其登录号分别为 IJ!K$L （基因）和 ,’-$ %$KD （蛋白）。荧光定量分析表明板栗短雄花序突变体较正常雄花序的脂质转运蛋白表达 量更高。将板栗脂质转运蛋白基因插入到硫氧还蛋白融合表达载体2)+D# ;（M ）中，构建了板栗的原核表达载体 2)+ N! # ，在大肠杆菌菌株 6/=?::;NO;P8+ Q # （B)D ）中，(@+F 诱导 R S 大量表达约为 D$ HT 的融合蛋白，通过 *8# M N AS?0;:8O =?2S;3/=? ;=: 0/U 柱纯化的融合蛋白具有抑制板栗镰刀菌属病原真菌孢子萌发的功能。 关键词：5 板栗；脂质转运蛋白；实时定量 6+ N@’6 ；抑菌功能 中图分类号：L %C1 ! ；VK!D1 #5 5 5 文献标识码：,5 5 5 文章编号：%$$ % W L!CC （#$ %$ ）$! W $$!D W $ !#$%$ ’$( )*+,-..%#$ #/ !0-.1$21 3%+%( 4,’$./-, 5,#1-%$ % # % # % % +;O XS?O 5 Y;O Z;8 5 I?O Y/O[8O 5 ’;/ V8O[8 5 S? YT;\T? 5 V8 -8O （%1 $%’(’ %) #*+, -./’+.’ *+0 ’.1+%%(2 ，3’/4 /+( 5+/6’78/,2 %) 9(7/.:,:7’5 3’/4 /+( %$##$ ； #1 ;’ *7,=’+, %) 3/%%( /.* ’.1+%%(2 ，3’/4 /+( 5+/6’78/,2 %) 9(7/.:,:7’5 3’/4 /+( %$##$ ） 67.1,’81 ：5 G\ T=8O 3;289 ;P2088A;:8/ / AB*, ?9 （6,’) ）:?AS8OT? ，; AB*, U;= 8=/0;:?9 3/P :S? PT:;:8/ U8:S =S/3: =:;P8;:? 80/3?=A?A? / $*8,*+’* =%/88/=* ;9 U;= 9?=8O;:?9 ;= 08289 :3;=?3 23/:?8 （-+@ ）O?? 4 +S8= AB*, ， $ 72 ，?A/9?9