高中生物2轮高效复习全套之 生物 第1部分 专题5---第1讲.pptVIP

基因工程的原理及应用 (2011年高考海南卷)回答有关基因工程的问题： (1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成________，常用抗原—抗体杂交技术。 (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。 【解析】　(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中心轴两侧将DNA切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线切开时，产生的是平末端。要使目的基因和质粒直接进行连接，应使用同种限制酶切割目的基因和质粒，使二者产生相同黏性末端。(2)一个基因表达载体的组成，除含有目的基因外，还必须含有启动子、终止子和标记基因。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合部位，可以驱动目的基因转录出mRNA。在用表达载体转化大肠杆菌时，为便于表达载体进入，常用CaCl2处理大肠杆菌。要检测目的基因是否转录出对应的mRNA，可采用分子杂交技术，即用目的基因片段作探针，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的的基因转录出了mRNA。(3)运用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，要先将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后将该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入到植物细胞的染色体DNA上。 主干知 识梳理 菜 单 热点考 向示例 隐 藏 高考专题复习 · 生物 山东金太阳书业有限公司 核心考 点突破 高效知 能检测 专题五 遗传变异与进化 第1讲　遗传的物质基础(含基因工程) 一、DNA是遗传物质的证据 1．肺炎双球菌的转化实验 (1)1928年格里菲思的实验(体内转化实验) ①过程及结果 ②分析 a．R型细菌无毒性，不会使小鼠死亡。 b．S型细菌 ，会使小鼠 ，而且S型细菌内有 的物质。 ③结论： (但没有证明转化因子是什么成分)。 (2)1944年艾弗里的实验(体外转化实验) ①过程及结果 有毒性 死亡 使R型细菌转化为S型细菌 加热杀死的S型细菌体内有“转化因子” ②分析 a．S型细菌的 细菌发生转化。 b．S型细菌的其他物质 。 ③结论：S型细菌体内的 是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。 (3)格里菲思实验与艾弗里实验的关系 格里菲思实验说明 ，艾弗里实验进一步证明 。 2．噬菌体侵染细菌的实验 (1)实验步骤：标记细菌→ 。 (2)实验结论：子代噬菌体的各种性状是 遗传的， 是噬菌体的遗传物质。 DNA使R型 不能使R型细菌发生转化 DNA S型细菌体内有转化因子 转化因子是DNA 标记噬菌体→噬菌体侵染细菌→保温 离心→检测放射性→观察分析得出结论 通过