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中国医科大学学报 第36卷 第6期 2O07年 l2月
· 680 · JOURNALOFCHINAMEDICAL UNIVERSITY Vo1.36 No.6 Dec.20昕
AMY1基因编码 0(淀粉酶在体外培养大鼠颌下腺细胞中的表达
周青 ,隋承光 ,王玉新
(1.中国医科大学附属13腔医院13腔颌面外科 ,辽宁 沈阳 110002;2.附属第一医院肿瘤研究所第二研究室)
[摘要]目的:检测大鼠颌下腺(SMG)AMY1基因编码 淀粉酶(ot—Amy)在体外培养颌下腺细胞中的表达,鉴定细胞来源和检
测体外培养细胞的功能。方法:分别进行培养大鼠细胞RT—PCR检测淀粉酶的基因表达;免疫印迹法(Westembl0tting)检测淀粉
酶蛋白质。结果:大鼠SMG组织和培养细胞检测在474bp处显示有一相同的带。表明大鼠培养SMG细胞RT—PCR产物与大鼠
SMG组织 一淀粉酶mRNA表达相同。免疫印迹结果显示大鼠SMG组织与培养细胞分别出现了一单独的 一淀粉酶免疫活性蛋
白电泳带,其分子大小为50kDa,两者免疫活性蛋白泳带一致。结论 :大鼠SMG组织和培养细胞淀粉酶mRNA表达相同,大鼠
培养SMG细胞与大鼠SMG组织具有同源性。体外培养SMG细胞通过 AMY1基因编码ot一淀粉酶表达。
[关键词]颌下腺 ;细胞培养;or一淀粉酶
[中图分类号]Q813.3 [文献标识码]A [文章编号]0258—4646(2007)06—0680~03
Theassayoftheexpression of -amylaseencodedbytheAM Y-1genein cultured cellof ratsubmandibular
gland
ZHOUQing,SUICheng—guang~,WANGYu—xin,
(1DepartmentofOralandMaxillofacialSurgery,TheAifihatedStonmtologicalHospital,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110002,
China;2.TheSecondLaboratory,CancerInstitute,TheFirstAffiliatedHospita1)
lAbstract]Objective:Toassaytheexpressionofot—amylasesgenesintheculturedcellsofsubmandibulargland(SMG)、Methods:Tissues
andhteculturedcellsofratsubmandibularglandwerehomogenizedandcrude —amylaseswereextracted.Themolecularweightofamy~ e
wasdeterminedbyWes nblotting.Th eamylasegeneexpressionofculturedcellswas assayde byRT—PCR.Results:Thema ylasegeneex-
pressionsofculturedcellsnadhtesubmandibularglandcellswereassayde respectivdybyRT-PCR.RT—PCR oftotalRNA was donewiht a
specificprimerforhteconsensussequenceofratma ylases.Th esamebnadofproductat474一bpwas foundinboht ofculturedcellsnadsub—
mnadibularglandcells,indicatinghtathteRT-PCRproductofculturedcellswas thesameas mRNA ofot—ma ylaseni submandibularglnad
cells,andhtustherewas homologybetweenhteculturedcellsandhtecellsofSMG.Amy~
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