CpG-ODN不同给药途径对哮喘小鼠炎症反应的影响及其机制探讨.pdfVIP

CpG一0DN不同给药途径对哮喘小鼠炎症反应的影响及其机制 探讨 中文摘要 【目的】 本实验研究CpG不同给药途径对哮喘小鼠肺泡灌洗液及外周血IFN吖、IL．4 细胞因子及气道组织病理改变的影响，同时检测NF．1cB在肺组织内的表达情况， 探讨CpG治疗哮喘的机制及其安全性。 【方法】 40只BALB／c小鼠随机分5组：A组为正常对照组，以PBS致敏激发；B 组为哮喘组，以OVA致敏激发；C组为地塞米松组，OVA致敏激发并于激发前 腹腔内注射地塞米松；D组为CpG腹腔注射组，OVA致敏激发并腹腔注射CpG； E组为CpG滴鼻组，0VA致敏激发并鼻腔滴入CpG。最后1次激发后24h内处 死动物并收集标本。计数肺泡灌洗液(BronchoalveolarLavageFluid，BALF)中的白 Immunosorbent (Enzyme．Linl(ed Assay，ELISA)检测BALF和血清中白细胞介素 -4(Interleukin一4，IL-4)及干扰素吖(Interferongamma，IFN吖)肺组织病理标本行 得数据均用统计学软件SPSSl3．O进行统计分析。 【结果】 1小鼠反应性观察 对照组小鼠无明显呼吸急促表现，行动活泼。哮喘组经OVA激发后出现呼 吸急促，烦躁不安，连续激发三天后，皮毛粗糙，活动能力下降。地塞米松组及 腹腔注射CpG组症状较哮喘组轻。CpG滴鼻组较哮喘组出现更加明显的呼吸短 促，皮毛粗糙，活动能力严重下降，对刺激反应迟钝，进食量少等表现。 2小鼠BALF中细胞学改变 哮喘组BALF中白细胞总数及Eos计数均较正常对照组有明显增加 (尸O．05)。经过地塞米松或CpG腹腔腹腔注射处理后，白细胞总数及Eos计数 均较哮喘组减少(尸0．05)。CpG滴鼻组肺泡灌洗液出现大量红细胞渗出，使用 嗜酸球细胞计数液处理后行Eos计数，计数结果比哮喘组明显降低(PO．05)。 3小鼠BALF中IL．4及INF吖表达水平变化 哮喘组BALF中炎症因子IL．4水平较正常组明显升高，INF．丫较正常组下降 较哮喘组无明显改变(胗0．05)。CpG腹腔组和CpG滴鼻组IL．4均较哮喘组有 滴鼻组较腹腔注射组升高更加明显(尸0．05)。 4小鼠血清中IL．4及INF吖表达水平变化 哮喘组血清中IL．4较正常组明显升高(尸O．05)，INF吖较正常组明显降低 (尸0．05)，地塞米松组IL．4较哮喘组明显降低(尸0．05)，INF吖无明显改变。 较哮喘组及地塞米松组均有升高(尸O．05)。CpG腹腔注射组与CpG滴鼻组相比 较差别无统计学意义。 5小鼠肺组织中的病理改变 HE染色见正常对照组小鼠肺组织支气管壁及周围结构完整，未见或仅少许 炎症细胞浸润，气道管腔内未见粘液栓塞等；哮喘组可见气管粘膜上皮细胞脱落， 周围组织中大量炎症细胞浸润，以嗜酸性粒细胞为主，管腔内可见多量分泌物； 地塞米松组及CpG腹腔注射组以上改变较为轻微；CpG滴鼻组肺组织未见明显 嗜酸性粒细胞浸润，但有大量红细胞渗出。 6小鼠肺组织NF．KB表达水平改变 正常对照组小鼠肺组织中仅有少量NF．KB表达；哮喘组中NF．1(B表达明显 增加，在支气管纤毛上皮，各种炎症细胞均有表达，且以胞核内表达为主，呈棕 黄色。地塞米松治疗组NF．KB表达较哮喘组明显减少，差别有统计学意义 NF．出较哮喘组和CpG滴鼻治疗组有升高，且以胞内强阳性表达为主(P0．05)。 2 【结论】 1、CpG不同给药途径均能逆转哮喘小鼠Thl／Tll2失衡，缓解过气道嗜酸性 粒细胞浸润。 2、CpG可能通过局部刺激激活核因子NF—KB，诱导Thl型细胞因子表达， 并通过Thl因子高表达拮抗Tll2型因子的表达。 3、不恰当的CpG刺激可能会导致Thl型应答过度，导致机体损伤。 【关键词】 哮喘；CpG—ODN；NF-KB miceandits onthe inasthmatic