Gax基因转染对低氧性PASMCs增殖及原癌基因表达的影响.pdfVIP

维普资讯 · 2436· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007．23(12)：2436—2439 [文章编号] 1000—4718(2007)l2—2436—04 Gax基 因转染对低氧性 PASMCs增殖及 原癌基因表达的影响 夏世金， 胡明冬， 白 莉， 钱桂生 (第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所，重庆400037) [摘 要] 目的：探讨生长终止特异性同源盒Gax基因转染对低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)中原 癌基因C—fos、C—junmRNA表达及细胞增殖的影响。方法：腺病毒介导 Gax基因(Ad—Gax)转染 PASMCs。在常 氧(21％O：)和低氧(2．5％O：)12h条件下，利用 RT—PCR和免疫细胞化学法分别测定转染组和未转染组PASMCs 中GaxmRNA和蛋白表达，以及C—fos、C—junmRNA表达变化 ；[H]一TdR掺入法检测各组 PASMCs增殖情况。 结果：RT—PCR和免疫细胞化学法证实Gax基因转染后 PASMCs中Gax能稳定过表达 ：转染组细胞C—fos、C—jun mRNA表达水平在常氧和低氧均低于未转染组细胞(P0．05，P0．01)；未转染组低氧时[H]一TdR掺入量比常 氧时高(P0．01)；在常氧和低氧时转染组[H]一TdR掺入量均低于未转染组(P0．05，P0．01)。结论 ：Gax基 因过表达可能通过下调C—fos、C—jun基因的表达来抑制低氧性PASMCs的增殖。 [关键词] 基因，Gax；缺氧；原癌基因；肺动脉平滑肌细胞；细胞增殖 [中图分类号] R363 [文献标识码] A EffectsofGaxgenetransfectiononproto—-oncogeneexpressionandpro-· liferation0fPASMCsinrats underhypoxiaconditions XIAShi—jin，HUMing—dong，BAILi，QIANGui—sheng (InstituteofRespiratoryDiseases，XinqiaoHospital，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400037，China．E— mail：qiangs@mail．tmmu．corn．ca) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectsofGaxgenetransfectiononexpressionsofC—fosandC—junmRNA andproliferationofpulmonarya~efialsmoothmusclecells(PASMCs)inratunderhypoxia．METHODS：PASMCswere transfectedwithGaxgenebyAd—Gax．Undernormaloxygentention(21％ O2)orhypoxia(2．5％ O2)for12hcondi- tion，expressionsofGaxmRNA andproteininPASMCswere detectedbyRT—PCR andimmunocytochemistry．Theexpres- sionsofc—fosandc一 nmRNAwereevaluatedbyRT—PCR．[H]一TdRincorporationwasusedtomeasurethe PASMCsproliferation．RESULTS：TheGaxoverexpressionintransfectiongroupwasconfimr edbyRT—PCR andimmuno- cytochemistry．Undernormaloxygententionorhypoxia，theC—fosandC-junmRNAlevelsintransfecti