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第30卷第4期 长春理工大学学报 (自然科学版 ) Vo1.30 No.4
2007年12月 JournalofChangchunUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition) Dec.2007
HBVfHEV二价抗原的载体构建与表达
张春兰,何秀霞,于源华,荀恒杰
(长春理工大学 生命科学技术学院,长春 130022)
摘 要:为构建一个能够表达 出乙/戊型肝炎二价疫苗抗原的大肠杆茵高效重组原核表达载体 ,采用PCR方法扩增
出HBV的S基 因,及HEV的ORF2编码区的羧基末端中的414.606aa的基因片段,经过T载体连接、茵落PCR、
双酶切、测序鉴定后,将这两部分重组入含有Q增强子的pTfl—T7高效的E.coli表达载体中。构建了pTf1.T7SE表
达载体并且表达出相应的 目的蛋白。该实验结果为研制预防乙型和戊型肝炎双价疫苗提供 了实验技术基础。
关键词:HBV;HEV;重组原核表达栽体;二价疫苗
中图分类号:Q786 文献标识码:A 文章编号:l672—9870(2007)04—0084—03
ConstructionandIdentificationofbiologicaltraitAssayof
HBV /HEV BivalentAntigen
ZHANGChunlan,HEXiuxia,YUYuanhua,XUNHengiie
(CoHegeofLifeScience,ChangchunUniversityofscienceandtechnology,Changchun130022)
Abstract:InordertoconstructanhighefficientexpressionvectorofE.coliexpressingbivalentvaccinalantigenwhichcan
resistHEVandHBV 。SgeneofThegenomeofHBVadrsubtypewasamplifiedbyPCRmethods,furthermore,genefran-
gmentencodingC-terminal414—606aaofORF2regionofHEV wasamplifiedbyPCR methods.ThroughTvectorlinkage
andvertificationofcolonyPCR,doubleenzymechopping,SgeneandthepartialgenefrangmentofORF2regionwerere—
combinatedcorrectlyintoahighefficientE .coliexpressionvectorpTO-T7containingQenhna cer.asaresultpTO-T7SE
expressionvectorwasconstructedandtheproteinofniterestcouldbeexpressedniE.coli.SOthatthisresultofferedagood
experimentbasisfordevelopmenthtebivalentvaccineoftheHEV andHBV hepatitissimultaneously.
Keywords:HBV ;HEV ;recombinantprokaryoticexpressionvectors;bivalentvaccine
乙肝病毒具有广泛的传染性,是全球性疾病, 与HBV和HEV感染有关。我国每年用于肝病及相
HBsAg的平均感染率为 10%,南方一些地方感染率 关疾病治疗费用高达 200多亿元,
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