HIL-29通过激活MAPK信号途径上调Hela细胞TLR3表达.pdfVIP

维普资讯 中国生化药物杂志 ChineseJoumal0fBi0chemicalPharmaceutics2007年第 28卷第 6期 369 HIL一29通过激活 MAPK信号途径上调 Hela细胞 TLR3表达 罗 欣，黄海 良，陈 兵 ，张胜权 (安徽医科大学 生物化学与分子生学教研室，安徽 合肥 230032) 摘 要 ：目的 探讨人 白细胞介素 29(hlL一29)对 Hela细胞 TLR3受体表达 的影 响。方法 重组的 hlL-29加入 Hela 细胞 中，以RT—PCR分析Toll样受体 3(TLR3)、25一寡聚腺苷酸合成酶 (25一OAS)、MXA蛋 白的mRNA表达水平变化 ， western—bl0t分析 TLR3受体蛋 白质水平变化及信号蛋 白MAPK(ERK1／2)激活变化 。结果 hlL-29显著上调TLR3受体 的mRNA水平和蛋 白质水平的表达 ，并且具有剂量依赖性 。hlL-29刺激 Hela细胞 18h后 ，25-OAS、MXA蛋 白的 mRNA表达水平显著升高(P0、01)。western—blot分析hlL-29刺激Hela细胞 5～30min后 ，信号蛋 白ERK1／2磷酸化 水平显著升高(P0、01)。结论 hlL-29可能通过激活 ERK1／2上调 (2—5一OAS)、MXA和 TLR3的表达 。 关键词 ：人 白介素 (hII)一29；TLR3；ERK1／2 中图分类号 ：R392 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—1678(2007)06—0369—03 HIL--29up--regulatetheexpressionofToll—-receptor3inHelacellinvolvedM APK activated LUO Xin，HUANG Hai—liang，CHENG Bing，ZHANG SHeng—quan (DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，AnhuiMedicalUniversity，Hefei230032，China) Abstract：PurposeToexplorethehumanInterleukin一29(hlL-29)regulatingtheexpressionofTLR3in Helacel1．M ethods RT—PCR analyzestheeffectofhIL一29onthemRNA leveloftheTLR3，25-OAS、MXA inHelacelltreatedwithva~ousconcentrationsofhIL一29for18h．TheproteinlevelchangeofTLR3wasana— lyzedbywestern—blot，andthesignalproteinactivatedwasdetectedbywestern—blottoo．Allexperimentswere performedinatleastthreeindependentassays．BlotsandagaroseelectrophoresiswerequantitatedusingBIO— IDsoftware(SIM)．Dataaresummarizedas ± ．Statisticalanalysisoftheresultswasperfomr edbySPSS 10 0software．ResultsThehIL一29significantlyup—reug latesthemRNA andproteinexpressionofTLR3ata dose—dependentways(P0．O1)．ThehIL一29alsoincreasedtheexpressionof25一OASandMXAinHela celltreatedwithhHIL一29ofr18h(P0．01ofrcomparisontotheuntreatedcontro1)．Thephosphorylationof ERK1／2kinasesincreasedaftertheHela cell