HIV-1 CHLJBF06044包膜特性分析.pdfVIP

维普资讯 第4l卷 第6期 哈尔滨医科大学学报 Vo1．41．No．6 2OO7年 l2月 JOURNALOFHARBINMEDICALUNlVERSⅡY Dec．，2007 537 HIV一1CHLJBF06044包膜特性分析 张 威 ，周海舟 ，王开利 ，程德春 ，张凤民 ，凌 虹 (1．齐齐哈尔医学院，黑龙江 齐齐哈尔 161042；2．哈尔滨医科大学 微生物学教研室，黑龙江 哈尔滨 150081； 3．黑龙江省疾病控制中心 病毒病研究所，黑龙江 哈尔滨 150030) [摘要] 目的 分析黑龙江省 I型人免疫缺陷病毒(mv一1)原代分离株 CHLJBF06044包膜糖蛋白的变异性及表型 特征。方法 从一名 HIV阳性感染者外周血单个核细胞提取 DNA，采用保守引物进行 HIV病毒包膜直接克隆，进 行序列分析及系统树分析。构建一株带该包膜蛋 白的伪病毒并利用表达 CXCR4和CCR5的靶细胞进行感染实验 ， 观察该病毒包膜利用辅助受体的表型特征。结果 共获得 2个有功能全 Env克隆，分别命名为 CHLJBF06044c7和 CHLJBF06044c8。获得2个有完整包膜基因的克隆，用全 Env氨基酸序列与国内分离株进行系统发育分析结果表 明，该株为B亚型。对包膜蛋白结构分析结果显示 ，分离株 CHLJBF06044c7和CHLJBF06044c8包膜在抗原性和亲水 性上没有明显差别。感染性检测结果显示该病毒只能感染U87．CD4．CCR5细胞，不能感染U87．CD4．CXCR4细胞。 结论 黑龙江省一名 HIV．1阳性者克隆到HIV一1CHLJBF06044病毒的包膜基因，该病毒属于B’亚型(泰国亚型)，为 CCR5亲嗜性毒株。 [关键词] I型人类免疫缺陷病毒；包膜；变异性；亚型 [中图分类号]R512．91 [文献标识码]A [文章编号]1000—1905(2007)06—0537—40 AnalyzingofthegeneticcharacteristicsofHIV—lCHIJBF06044envelope ZHANG Wei，ZHOU Hai—zhou，WANG Kai—li，etaf (DepartmentofMicrobiology，HarbinMedcialUniversity，Harbin150081，China) Abstract：Objective Toanalyzethevariabilitynadphenotypeofenvelopeglycoprotein(Env)ofhmnanim— munodeficiencyvirusprevalenceinHeilongjinagprovince．Methods Thefull—lengthenugenecloningfrom PBMCsofaHⅣ一1positiveindividualinHeilongjinagprovince．Chinawasclonedusingconservderegionprim— ers．Th eamplifide PCRproductswere clonde nadsequencde ．Th efulllengthenvaminoacidsequencehadbeen na alyzde byphylogeneticnaalysis．Subsequently，aH1V一1pseudotypeclviruswiht hteenvelope proteinWas con— structde nadhteinfectivityWas examinedusingU87celllinesexpressingCIM wiht eih