农杆菌介导大豆子叶节转化体系优化及转植酸酶基因大豆功能鉴定.pdfVIP

农杆菌介导大豆子叶节转化体系优化及转植酸酶基因大豆功能鉴定.pdf

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中文摘要 本研究以品系12,冀豆12和豫豆22三个大豆品种为材料,采用农杆菌介 导方法对大豆子叶节进行转化,设计了不同品种、不同共培养光照条件和不同 共培养时间的正交试验将植酸酶基因p圳基因转入大豆基因组内,并得到了一 批抗性植株。利用转基因高代植株吉林35对转基因大豆进行功能鉴定。 (1)大豆遗传转化体系优化:在本研究范围内大豆品种冀豆12子叶节在 h光照的条件下共培养10 侵染以后,接种到pH5.4的共培养基上,在24℃,10 d,诱导筛选,获得较高的抗性芽出芽率。 (2)提取T6代转基因植株mI斟A,根据p办∥基因设计引物进行逆转录, 说明目的基因在转基因大豆植株中稳定遗传和表达。 (3)本试验以转植酸酶基因大豆高代植株不同株系为供试材料,利用营养 液液体培养和固体培养基无菌培养的方法,测定了不同转化株系根系分泌植酸 酶的能力和不同磷处理条件下对磷的吸收利用能力。结果表明,植酸钠处理下, 高代转化株系根系分泌植酸酶能力高于对照植株,营养液培养条件下T6.12、 T6-44、T6.66与对照差异显著,超对照2.9.3.5倍:而在固体培养基无菌培养条 件下T6.3、T6.12和T6.44与对照差异显著,提高2.4.2.8倍。植酸磷处理下, 转化株系磷含量比对照株系高1.11.3.18倍,T6.12、T6.44分别是对照的2.34倍、 3.18倍。沙培植酸磷处理条件下,转基因植株性状优于对照,提高了单株籽粒 产量,株系9和株系13的单株粒数是对照的2.9和2.5倍,二者的单株粒重是 对照的2.2和1.8倍。证明植酸酶基因在转基因大豆中成功表达,增加根系植酸 酶的分泌能力,提高植物对有机磷的利用效率。 关键词:大豆子叶节;植酸酶基因;遗传转化;植酸酶活性;磷吸收利用 II ABSTRACT totmsfer the usedas materials PirⅨil 1 22are p,醪“to 2,Jidou2,Y|udou plant of of trallsfo肌ation t11emetllod system soybe趾by a伊obacteri啪一mediated batchesof some nodesandwehaVe desigll cotyledon acquired soybeaIlpl趾ts.We the oftransfonnationof including to system soybean experimentsoptimizing thetimeofcocultiVation di旋rent conditionsand by cultivars,difrerentlighting to test.The

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