白蛋白酸致变性动态激光散斑的研究.docVIP

白蛋白酸致变性的动态激光散斑研究* 李新忠，甄志强，李立本，陈庆东 ( 河南科技大学 理学院，洛阳 471003) Investigation of the acid denaturation of the albumin using the dynamic laser speckle methods Li Xinzhong, Zhen Zhiqiang, Li Liben, Chen Qingdong ( School of Science, Henan University of Science Technlogy, Luoyang 471003, China) Abstract: The process of the acid denaturation of the albumin was studied using dynamic laser speckle methods. The dynamic speckle pattern sequences were generated using the dynamic speckle theory firstly. And then, the acid denaturation process of the albumin was analyzed using the time history speckle patterns (THSP) and its gray level co-occurrence matrix (GLCM) obtained from simulation and experiments. Furthermore, this denaturation process was investigated throughly using the inertia moment of the GLCM and the mean contrast methods. The theoretical simulation and the experiments results show that the protein particles movement changed from high activity to low activity gradually in the colloid solution during the denaturation process, meanwhile, the quantity of the protein particles decreased and its size increased. The dynamic laser speckle method is a novel real-time, quick and effective method to study the albumin denaturation. Key words: Albumin; Denaturation; Laser speckle; Dynamics 引言 蛋白质分子易受外界因素(如：温度、变性剂等)影响而发生构象变化，从而丧失生物活性，引起物理化学性质的异常变化，这一过程称为蛋白质变性。白蛋白是蛋白质中最重要的一种，白蛋白是维持人体正常生理机能的重要物质，白蛋白含量可作为疾病诊断指标，是食物加工的重要成分[1]。研究白蛋白组分的稳定性及在外界条件改变时的变性过程具有重要的科学价值，酸致变性是白蛋白变性中最常见的一类现象。在蛋白质的结构和变性研究中传统检测方法如：OCT光谱[2]、X射线散射[3]、电泳[4]等手段大都存在花费高、实时性差的缺点。 近年来，动态散斑方法在医学生物学中获得了大量的应用[5-10]，如：大豆种子发育能力研究[5][6]、水果擦伤研究[7]、溶液微粒及血小板凝聚过程研究[8-10]等。尽管动态散斑在生物学中的研究众多，但尚没有见到利用动态散斑方法对白蛋白的酸致变性过程进行研究的相关报道。 本文试利用动态激光散斑的方法来实现对白蛋白酸致变性过程的动态实时检测。利用动态激光散斑模拟方法，对白蛋白酸致变性过程进行理论模拟及实验研究。初步获得了白蛋白酸致变性过程蛋白质分子的絮结信息图像，为研究白蛋白的变性提供了一种崭新的检测方法。 理论基础 2.1动态散斑序列的模拟生成[11,12] 动态散斑序列的模拟基于4f光学成像系统，动态散斑序列图中每幅散斑图的光强由下式生成： (1) 其中，m=n=0,1,…,N-1，为CCD探测器的像素坐标。k＝0，1，2，…，K-1为散斑图序列的标号，共有K幅。((m,n,k)是一个代表粗糙面散射光相位分布的N×N矩阵；i为虚数单位；F