用于昆虫外激素研究的微量顶空收集及热解吸气相色谱进样方法初探.pdfVIP

研究简报 用于昆虫外激素研究的微量顶空收集及 热解吸气相色谱进样方法初探 柳丹侠 北（京大学生物系 北京 100871） 提 要 描述了一个结合顶空气流收集与无溶剂热解吸气相色谱进样的方法。用填充PorapakQ的微量注射器 作为吸附管进行气流收集。将收集物不经溶剂洗脱直接进行热解吸进样。用人工合成的昆虫外激素化合物反-7- 十二碳单烯乙酸酯 （E-7-DA）及顺-5，反-7-十二碳二烯乙酸酯 （Z-5,E-7-DDA）测定了方法的回收率，初步探 索了运用于昆虫外激素分析的可行性，并讨论了提高回收率的途径。 关健词 气相色谱法，顶空收集，昆虫外激素，热解吸进样 分类号 O658/Q57 7-DDA注入盘尼西林瓶中进行气流收集。瓶温控制 1 前言 为40 ，以避免挥发性成分再冷凝在针头上。 由于昆虫外激素挥发性强，含量微，而杂质含量 相对很高，因而给收集分离及结构鉴定带来困难。用 气流收集法可直接收集处于召唤状态 释（放外激素 的行为）的昆虫上空的挥发性成分，从而避免了高沸 点成分对气相色谱分析的干扰。气流收集法是将活 的昆虫放在密闭容器内，将该容器置入流动的空气 的气路中，流经活虫的空气中的挥发性成分被冷 凝 （或被吸附2（），将冷阱或吸附管的洗脱液浓缩后 用于气相色谱分析。本文初步发展了一个用微量注 射器作为吸附及解吸管的热解吸气相色谱进样法， 并初步探索了气流收集样品不经洗脱直接热解吸进 样以及减少浓缩过程挥发性成分丢失的可行性。 2 设备和方法 2.1气流收集 为了发展方法，以人工合成的昆虫外激素化合 2.2 热解吸气相色谱进样 物E-7-DA或Z-5,E-7-DDA的CH2Cl2溶液代替 自制的热解吸进样器用电烙铁的电热蕊作为加 活虫进行气流收集 （图1）。在一个1mL注射器 内填 热器，加热器外绕上石棉绳绝热。将控温仪热电偶放 充活性碳用以净化空气，在另一个50μ蘈L微量注射器 置在加热器及石棉层之间以控制温度，使温度恒定 内填充25蘈μLPorapakQ(80～100目）用以吸附气流 为180～184 。 中的挥发性成分。活性碳及PorapakQ均于用前严 进样时将注射器吸附管从气流收集器的气路中 格净化并活化。两注射器均插入一密封的盘尼西林 取出。用填充柱做色谱分析时 （图2），首先将注射器 瓶中。连接该装置到真空水泵，调节流量使流量计读 蕊插入注射器的外套，插入深度以能固定注射器蕊 数恒定在所需试验值。然后将E-7-DA或Z-5,E- 为宜。然后立即将该注射器吸附管插入热解器。吸附 本文收稿日期：1995-11-12，修回日期：1996-07-27 在吸附剂上的挥发性组分在热解器内汽化。待热解 收率为49％ァ。热解吸回收率低于20ngE-7-DA用填 约1min后，缓缓推动注射器蕊直到接触吸附剂为 充柱分析的结果，原因可能是样品量10倍于E-7- 止。整个热解进样时间为1.5min。用毛细柱做色谱分 DA，虽然热解吸进样时间4倍于E-7-DA，但进样仍 析时，由于毛细柱阻尼大，载气造成的柱前压高，因 然不完全 。 而需将注射器尾端与另一钢瓶相连接，使钢瓶出口 图3为40ngE-7-DA用表1所列条件进行气流收 压略大于色谱柱前压。连接好后立即将注射器插入 集、热解吸进样及色谱分析的结果。回收率如表1所 热解器，挥发性成分即被带入进样器。整个热解进样 示。由图3-b可见：热解吸进样无溶剂峰，色谱峰尖 时间为5.5min。无论用填充柱或毛细柱进行分析，挥 锐，无扩散无拖尾，峰形不亚于直接进样。 发性成分均经色谱进样器到达色谱柱并凝结