气库上方土壤中甲烷氧化菌群落研究_以大港油田板873储气库为例.pdfVIP

·364 · 　 石油天然气学报 (江汉石油学院学报) 20 10 年 6 月 气库上方土壤中甲烷氧化菌群落研究 ———以大港油田板 873 储气库为例 ( ( ) ) 　　张 　凡　 中国地质大学 北京 能源学院 , 北京 100083 ( ) 　　佘跃惠 , 舒福昌, 孔淑琼 , 周玲革　 长江大学化学与工程学院 , 湖北 荆州 434023 ( ( ) ) 　　候读杰　 中国地质大学 北京 能源学院 , 北京 100083 [摘要] 利用基于甲烷氧化菌 (MOB) 功能基因p moA 克隆建库以及变形梯度凝胶电泳 (D GGE) 分子生 态学方法来研究已知的大港油田天然气库上方土壤样品甲烷氧化菌群落多样性 。构建了同一取样点不同 深度土壤样品 5 个甲烷氧化菌功能基因p moA 基因克隆建库 , 所有的克隆都属于甲烷氧化菌 。克隆文库 结果显示同一剖面不同深度土壤中 MOB 的优势菌群有所不同: 优势菌甲基弯曲菌属 ( Met hylo sinu s) 出 现在所有的 5 个克隆文库中。甲基孢囊菌属 (Met hylocy sti s) 在文库中所 占得比例从 11 % (D G05) 上升 到 30 % (D G1) , 在文库 D G15 达到 3 1 % , 接着下降4 % ( D G2) , 在文库 D G25 没有发现甲基孢囊菌属 (Met hylocysti s) 。D GGE 电泳图也同样显示出以上的甲烷氧化菌菌群的变化 。 ( ) [ 关键词] 甲烷氧化菌 p moA 基因; 甲烷氧化菌群落 ; 克隆文库 ; 变性梯度凝胶电泳 D GGE [ 中图分类号] T E822 [文献标识码] A 　　 [文章编号] (20 10) 在油气藏压力的驱动下其轻烃气体持续的向地表作垂直的扩散和运移 , 土壤中的专性微生物以轻烃 作为唯一的能源 , 在油气藏正上方 的土壤 中非正常发育并形成微生物异常[ 1 ] 。微生物油气勘探 (M PO G , Microbial Pro sp ect of Oil and Ga s) 技术通过检测这种异常进而预测下伏油气藏的存在 。甲烷 氧化菌是以甲烷作为唯一碳源和能源的细菌 , 常被用来作为 MPO G 的指示菌[2 ,3 ] 。 传统的MPO G 技术是利用微生物计数 、富集培养 、分离以及微生物代谢产物的生理、生化分析来研 究土壤中甲烷氧化菌的异常 , 从而预测油气藏的存在[4～6 ] 。但是 , 研究表明, 可培养微生物仅 占自然界微 生物的0 1 %～15 %左右[7 ] , 而且能培养的甲烷氧化菌有 130 多种 , 传统培养方法得到的甲烷氧化菌为混 合菌 , 不能确定其种属 , 因此仅通过研究可培养的甲烷氧化菌异常来预测下伏油气藏的存在是不全面的、 不精确的。分子生态学方法就是在未培养基础上通过系统发育以及功能基因探针的方法来直接分析土壤样 品中的甲烷氧化菌[ 8 ]