福建专升本无机与分析化学第十一章、吸光光度分析法.docVIP

第十一章 吸光光度分析法 一、概述 吸光光度法:依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。 主要有: 红外吸收光谱：吸收光波长范围2.5(1000 (m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：吸收光波长范围200(400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：吸收光波长范围400(750 nm ，主要用于有色物质的定量分析 1、光的性质 光是一种电磁波。 可见光：人的眼睛能感觉到的波长范围在400～760 nm的光 单色光：只具有一种波长的光 互补色光：如果将两种适当颜色的单色光按一定强度比例混合，可以得到白光，通常将这两种颜色的单色光 2、物质对光的选择性吸收： 当一束白光通过某溶液时，如果溶液对各种颜色的光均不吸收，则溶液是无色的；如果溶液只吸收了白光中一部分波长的光，而其余的光都透过溶液，则溶液呈现出透过光的颜色即呈现出吸收光的互补色光的颜色 例如，CuSO4溶液选择性地吸收了白光中的黄色光而呈现蓝色；KMnO4溶液选择性地吸收了白光中的绿色光而呈现紫红色。 3、吸收光谱 物质的光吸收曲线或吸收光谱: 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到的曲线 最大吸收波长（maximum absorption）： 对应于光吸收程度最大处的波长称最大吸收波长，以λ最大或λmax表示 由图可见： 在可见光范围内，KMnO4水溶液对不同波长的光的吸收情况不同 四条曲线的最大值均出现在525 nm波长处，即KMnO4水溶液的最大吸收波长λmax = 525 nm，不随浓度的变化而改变，且不同浓度KMnO4水溶液的吸收光谱形状是完全相似的。 不同浓度的同种物质的溶液，在一定波长处吸光度随溶液浓度的增加而增大。 二、光吸收基本定律 1、朗伯一比耳定律 透光率或透光度T :透过光强度It与入射强度I0之比 T=It/I0 溶液的透光率愈大，表示它对光的吸收愈小；相反，透光率愈小，表示它对光的吸收愈大。 吸光度A的定义为： A=lg（I0/It）=lg1/T=-lgT 显然，A大，则吸收程度大，A小则吸收程度小。 朗伯一比耳定律：当一束单色光通过含有吸光物质的溶液后，溶液的吸光度与吸光物质浓度及液层厚度成正比 其数学表达式： A=kbc A为吸光度；b为液层厚度，单位是cm；c为溶液浓度；k为比例常数，它与入射光的波长、有色物质的性质和溶液的温度等有关。 2、吸光系数与摩尔吸光系数 当c的单位为g·L-1时，比例常数k以a表示，称为吸光系数，单位为L·g-1·cm-1 此时，朗伯比尔定律变为 A=abc 当c的单位为mol·L-1时，k以ε表示，称为摩尔吸光系数,单位为L·mol-1·cm-1 这时，朗伯比耳定律变为： A=εbc 例 有浓度为1.6(10-5 mol·L-1的有色溶液，在430 nm处的摩尔吸光系数为3.3(104 L·mol-1·cm-1，液层厚度为1.0 cm，计算其吸光度和透光率 解： 例 用邻二氮菲光度法测定铁。已知Fe2+浓度为1 000 μg·L-1，液层厚度为2.0 cm，在波长510 nm处测得吸光度为0.38，计算摩尔吸光系数。 解： 三、分光光度计 分光光度计的主要组成部件： 光源 6～12 V钨丝灯 单色器 由狭缝、色散元件及透镜组成 吸收池（也称比色皿） 由光学玻璃或石英玻璃制成（紫外光必须采用石英池） 检测器 有硒光电池、光电管、光电倍增管 显示记录系统 四、偏离朗伯-比耳定律 非单色光引起的偏离； 介质不均匀引起偏离； 因吸光物质离解、缔合等导致偏离 五、测量条件的选择 选择合适的入射波长 最大吸收波长 控制适当的读数范围 0.2～0.8 选择适当的参比溶液（空白溶液） 若样品溶液、试剂、显色剂均无色时，可用溶剂作参比（溶剂空白）；若显色剂或其它试剂是有色的，应选用不加待测液的试剂溶液作参比（试剂空白）；如果试剂是无色的，而被测试液中存在其它有色离子，则选用不加显色剂的被测试液作参比（试液空白） 六、显色反应及其影响因素 1、显色反应 显色反应：将被测组分转变成有色化合物的反应 显色剂：显色反应中所加入的试剂 2、影响显色反应的因素 显色剂用量 吸光度A与显色剂用量CR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。 溶液的酸度 在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围 显色温度 显色时间 溶剂 加入适量的有机溶剂或用有机溶剂萃取，可以使有色化合物颜色加深，提高显色反应的灵敏度