枸杞组培快速繁殖技术的研究.doc

枸杞组培快速繁殖技术研究 ①本文通过对“宁杞２号”枸杞离体组织培养的研究，进行了丛生芽诱导，试管母本的建立，嫩梢增殖，生根状况分析及其移栽等方面的探讨，进而探索了组培快速繁殖以及生产上适用的组培技术，结果表明：改良ＭＳ＋ＢＡ０．２＋ＫＴ０．３＋ＮＡＡ０．５和改良ＭＳ＋ＢＡ０．７５＋ＮＡＡ１＋ＩＢＡ０．１交替使用，可加快增殖速度；以较短的根系移栽试管苗，既省工、省力，又能提高成活率，从而确立了一套较为理想的快速繁殖体系，为大规模工厂化育苗提供了可靠依据 ②选用“宁杞2号”离体组织进行了愈伤组织诱导和生根状况的研究．筛选出了适宜的愈伤组织诱导和生根的培养基．结果表明，最适的愈伤组织诱导培养基为1／2MS＋BA1．0mg／L＋NAA1．0mg／L,最适的生根培养基是；1／2MS＋NAA0．6mg／L＋IBA0．2mg／L． ③本试验以枸杞嫩枝及顶芽作外植体进行组织培养。结果表明,不定芽诱导用 MS + 6-BA 1.0mg/L +NAA 0.1mg/L;增殖培养基以 MS + 6-BA 0.5mg/L + IBA 1.0mg/L 较佳;生根培养基为 1/2MS(大量元素减半,其它成分不变) + IBA0.1mg/L+ 活性碳 0.1%。　 ④植物名称:宁夏枸杞(Lycium barbarum) 材料类别:多年生植株上当年萌生出的嫩枝茎尖。培养条件:基本培养基为MS。长芽培养基中的激素成分为(毫克/升):①IAA0.5,KT1,②IAA0.5,BA1。蔗糖浓度为3％。生根培养基成分为1/2MS(大量元素减半),附加Zt0.2,NAA0.4,蔗糖浓度2％。培养温度25～30℃,自然光照。 　⑤MS和MS(1/ 2大量、微量元素全量 )培养基均适于枸杞的培养、芽增殖和发根 .在培养基的附加成分中激素的调节是重要的 ,激素以IBA浓度在 0～ 1.1× 10 - 6 mol/L均适其培养 ,但以IBA的浓度为 5 .5× 10 - 7mol/L效果最佳 ,在有机成份中VB1的含量对发根有明显的促进作用 .微量全量对枸杞的发根是必需的 .MS(1/ 2大量、微量元素全量 ) +VB12 .96× 10 - 5mol/L +IBA5 .5× 10 - 7mol/L(其他有机成分常量 )是枸杞芽增殖与发根同步的最佳培养基 . ⑥枸杞属植物(Lycium haminifoliumMill)花粉粒发育成胚和植株的形成已有报导。本文报导枸杞叶外植体的愈伤组织诱导及其植株的再生。从未开花植株上摘取无病虫害的叶片作材料,先用流水冲洗除去尘土,然后在70％的酒精中浸20秒左右,再在含万分之二昇汞和5％安替福民的溶液中消毒4～5分钟(消毒时间不能过长,以免伤害叶片)。用无菌水淋洗3～5次后,在无菌条件下将叶片横切成1厘米左右的切段,接种在Murashige和Skoog培养基上,培养基附加激动素(K)2.0,吲哚乙酸(IAA)2.0或K4.0,IAA 枸杞髓组织离体培养及高频率植株再生的研究* 曹有龙　陈　放　罗　青　曲　琳 摘　要：枸杞髓组织在4种MS培养基上都能诱导出愈伤组织，诱导率53.7%～100%。在培养基MS + 6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.5 mg/L获得的愈伤组织，呈颗粒状，分散性能好，胚性细胞多。将其转移到MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.01 mg/L 的分化培养基上获得大量绿色小芽，小芽在MS + 6-BA 0.2 mg/L的培养基上得到快速繁殖，繁殖系数50～150株/芽.月。丛生芽在MS + NAA 0.2 mg/L的培养基上形成完整植株。关键词：枸杞；髓组织；离体培养；植株再生　　枸杞（Lycium barbarum L.）是重要的药用植物，多年来，国内外科技工作者十分重视枸杞的组织培养，已有用叶片、花药、下胚轴、茎端及幼嫩子房为材料进行组织培养分化出植株的〔1,2,3〕，我们在此基础上，以枸杞髓组织为试验材料进行组织培养，获得了再生植株，为枸杞细胞突变体的筛选、细胞悬浮培养、原生质分离、细胞杂交、基因转移的研究提供依据。 1　材料和方法 1.1　试验材料　供试材料为宁夏农科院枸杞研究所培育的高产优质枸杞新品种——宁杞１号。1.2.1　愈伤组织的诱导　取当年生长的明显分化成髓组织的枝条，摘除叶子、侧芽和带有分生组织的顶端100 mm，把外植体的切端蘸熔蜡封着伤口，然后浸入70％酒精中20 s，再转入0.1%HgCl2溶液中，经过8～10 min后，用无菌水冲洗3遍，最后以吸水纸吸干，从茎的两端各切除10 mm，余下部分切成20 mm的小段，用无菌镊子夹着茎的切段，用瓶塞打孔器从切段中取出圆柱体髓组织，并将其转移到90 mm的无菌培养皿中，用解剖刀切成2～3 mm厚的小圆片，接种到4种含不同激素