特定序列脱氧核糖核酸电化学生物传感器进展.pdfVIP

特定序列脱氧核糖核酸电化学生物传感器进展.pdf

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( ) 第 29 卷 分析化学 FENXI HUAXUE  评述与进展 第 3 期                           2001 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 355~360 特定序列脱氧核糖核酸电化学生物传感器进展 杨丽菊 彭图治 (浙江大学西溪校区化学系 ,杭州 310028) ( ) 摘  要  对当今电分析化学中的研究热点之一 ———脱氧核糖核酸 DNA 的电化学生物传感技术的最新 进展进行了综述 ,评述了其发展前景。 关键词  脱氧核糖核酸 , 电化学生物传感器,评述 1  引  言 ( ) 脱氧核糖核酸 DNA 是遗传信息的承担者 ,具有贮存和传递信息的功能。绝大多数生物体的遗传 信息储存在 DNA 分子中 ,DNA 的复制构成了遗传的分子基础。DNA 是多聚脱氧核苷酸 ,其组成可简述 如下 : DNA 分子的一级结构是核苷酸通过 3′,5′磷酸二酯键连接成没有支链的直线形或环形结构。1953 年 , Watson 和 Crick 提出了 DNA 双螺旋模型的二级结构 , 即DNA 分子是由两条多脱氧核糖核酸链组成 ,链 的内侧是碱基 ,两条链以反平行方向盘绕同一条轴形成右旋的双螺旋结构 ,两条链上的碱基是匹配的 , 称为碱基互补 ,腺嘌呤和胸腺嘧啶以两个氢键连接 ,鸟嘌呤和胞嘧啶以 3 个氢键连结。在 DNA 分子中 互补碱基的含量相等。在二级结构的基础上 ,DNA 分子还可以扭曲或卷曲形成超螺旋三级结构 〔1〕。 9 DNA 被称为生命体内的基因物质 ,人类基因组含有 3 ×10 个碱基对 ,它的全序列的测定已经提前 完成 ,这一宏伟目标的实现不仅能使人们从根本上对人体的所有生命活动有全面的了解 ,而且会对某些 现在还不能控制的疾病 ,找到根本的治疗方法 〔2 〕。研究发现 ,DNA 分子中碱基序列的变异与人类的许 〔3 〕 β 多遗传疾病有关 ,这些变异的复杂程度各不相同 。例如 , 珠蛋白基因的点突变中 ,一个胸腺嘧啶被 腺嘌呤替代 ,从而引起氨基酸替代 ,导致镰状红血球盆血症 〔4 〕。70 %的囊性纤维变性病人和携带者与转 移膜控制蛋白质基因编码中的一种三碱基残缺有关 〔5 〕。亨廷顿氏症是因为正常基因插入了重复的多碱 基单位而增长 〔6 〕。因此 ,对人体的血液、组织及体液等样品中所含的特定 DNA 序列的测定结果 ,可用于 确证感染疾病的细菌和病毒根源。检测与疾病有关的变异对基因筛选、遗传疾病的早期诊断和治疗具 有十分深远的意义。 由于DNA 序列测定的传统方法操作繁琐费时 ,且使用放射性同位素作标记 〔7 〕, 已不适用于常规分 析。各种新的技术不断发展 ,并逐渐代替传统分析法 ,其显著改进在于采用了非放射性的生物素、地谷 新配基及荧光染料作标记物 〔8~10〕。基于荧光信号的测定是目前DNA 测定的最准确方法 ,但所需的仪 ( ) 〔11〕 器昂贵 ,且难以实现自动化。此外 ,聚合酶链反应 PCR 也已广泛用于感染病毒的测定 。该方法虽具 收稿 接受 ( ) 本文系国家自然科学基金 No. 2997502

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