微生物谷氨酰胺转胺酶高产菌株诱变选育.pdfVIP

62 2003,VoL24,No．5 ※基础研究 [3] 刘铁成．中国西洋参 [M]．人民卫生出版社．1995．143— 1977．223—268． 150． [10] 北京医学院、北京中医学院合编．中草药成分化学[M]． [4] HFSchaeferIII(ed)．MethodsofElectronicStruc— 北京：人民卫生出版社，1981．164-170． tureTheory[M]．PrenumPress，1977． [11] 徐光宪，黎乐民，王德民．量子化学[M]．北京：科学出版社． [5] 姚新生．天然药物化学 (第二版)[M]．人民卫生出版社． 1985．962—1010． 1995．326—336． [12] 王毅等．人参皂苷Rgl对Pc2凋亡保护作用的可能机制 [J]． [6] 王宗睦，陈阴遗译．休克尔分子轨道矩阵图形方法 [M]．科 药学学报，2000，35(4)：284-288． 学出版社．1982．370-420． [13] 陈晓春等．人参皂苷Rgl的肠内菌代谢及其代谢产物吸收 [7] 文振翼，姚惟馨译．原子价理论 [M]．科学出版社．1981．326— 入血的研究[J]．药学学报，2001，36(6)：411-414． 386． 【14J 王晓英等．人参皂苷Rgl对B一淀粉样肽 (25-35)侧脑室注 [8] 吉林大学量子化学组．分子轨道图形理论[J]．化学通报， 射所致小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制 [G]．药学 1977，(1)：28—36． 学报，2001，36(1)：卜4． [9] HFSchaeferⅢ (ed)．ApplicationsofElectronic [15] 庞焕等．20(S)一人参皂苷Rg3人体药代动力学研究[J]．药 StructureTheory．UniversityCalifomiaBerkely[M]． 学学报，2001，36(3)：170—173． 微生物谷氨酰胺转胺酶高产菌株的诱变选育 王 璋，王灼维 (中国食品发酵工业研究院，北京 100027) 摘 要：以本实验室筛选的Streptomycessp．WZFF．W-12(谷氨酰胺转胺酶活0．24U／m1)为出发菌株，孢子经预培 养处理处于萌发状态后制备成单孢子悬浮液，用 卜甲基一3一硝基一卜亚硝基胍 (NTG)单独和结合羟胺进行多次复合诱 变处理。实验发现，诱变处理后菌落的形态变异等特征与产酶能力呈相关关系，并被用于最初的突变菌落挑选。接着 先后采用蛋白质交联凝絮一沉淀性能分析的初筛试验和摇瓶测定酶活的复筛试验分离选育高产酶突变菌株，最后获得 一 产酶活力达2．18U／ml的高产菌株w一12vsrHZ3，酶活相对提高了8倍。对该菌株进行分类鉴定方面的理化性能 测试和传代实验结果表明，该菌遗传性较为稳定，而且其理化性能与已报道的产酶菌种明显不同。 关键词：链霉菌；谷氨酰胺转胺酶；复合诱变；NTG；羟胺 Abstract：Thesp0resofStreptomycessp．W ZFEW -12isolatedfromsoilin0urla】b0瞄t0 tOproducemicrobial位msg 纽mimse frG)about0．24U／ml，WCICprceulturedandthentreatedseveral byNTGsinglyandwithhydroxylammoniumchloride forcomplexgeneticmutation．Ther