免疫传感器中新的生物分子固定化方法研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年 10月 JOURNALOFGUANGXINORMALUNIVERSITY Vol.21 No.4 免疫传感器中新的生物分子固定化方法研究 沈 国励 ，俞汝勤 (化学牛物传感与计鳍学国家重点实验室.湖南大学 化学化工学院.湖南 长沙410082) 在免疫传感器研究中，生物分子的固定化方法是构建性能优良的免疫传感器较关键的步骤 本文简述 本实验室近年在这一领域开展的工作. ①等离子体聚合膜是一种具有高度交联网状结构的膜，膜超薄，均匀，与基础电极表面的附着力强，结 合聚电解质和其它生物分子的自组装技术，设计成一些优良的固定抗原(抗体)的传感器界面，研制了二类 免疫传感器.这些传感器制作简便，表面容易更新，且重复性和稳定性较好;②褐藻酸钠与壳聚搪之间可通 过静电结合形成牢固的使小分子透过的天然高分子膜.将褐藻酸钠通过EDC活化后与目标生物分子相 联，将壳聚搪包埋在碳糊电极中，使负载有生物分子的褐藻酸钠与固定在电极表面的壳聚糖分子之间发生 静电自组装的同时也将生物组分固定到电极表面而完成了免疫传感器的制备.这种固定化方法具有重复 性好、蛋白质的非特异性吸附影响较低的特点;③三经甲基氨基甲烷(Tris)改性的褐藻酸钠或通过胧胺而 固定在金电极表面的Tris改性的褐藻酸钠在Cat`存在下引发固定抗体可用于研制电化学免疫传感器.结 果表明，按此方法研制的免疫传感器具有重现性和重复使用性能好及蛋白质的非特异性吸附影响低等特 点;}I)K型角叉皂素(K-LC)为带磺酸基的天然聚电解质，是一种具有强电负性的物质，将 一‘LC与蛋白质 偶联，可以增强蛋白质的负电性，而使通过静电自组装技术固定的蛋白质的稳定性得到提高.在用于免疫 分析中具有重复性较好、非特异性吸附影响低等特点;⑤基于邻氨基硫酚低聚合物膜表面存在自由的氨 基，可用戊二醛或结合纳米金来固定抗体(抗原).因邻氨基硫酚低聚合物膜可完全封闭金电极表面，而且 所形成的低聚合膜为一种有机半导体膜，可赋予传感器具有较高的初始电容值，可发展一种检测浓度范围 较宽，灵敏度较高的电容型免疫传感器.采用循环伏安法研究这类传感器的基本性能如法拉第电流效应、 离子的不可通透性等，均表明该低聚合膜能很好的满足构建电容免疫传感器的要求;⑧用聚苯乙烯作粘结 剂及聚乙烯醇作助剂代替常用的石蜡制备了改进的碳糊电极，用于吸附固定抗体(抗原)，研制免疫传感 器，采用该电极组分研制的传感器，较石蜡碳糊电极具有更高的灵敏度，且该电极能用简单的抛光处理重 复使用，并具有良好的重现性、重复使用性和较低的蛋白质非特性吸附等性能;⑦纳米金可用于吸附固定 抗体，研究结果表明，纳米金能降低一些物质在电极上发生反应的氧化还原电位，并催化这些物质在电极 上的电化学氧化还原反应.利用纳米金的上述特征，可设计成非标记的电化学免疫传感器. STUDIESOFNOVELTECHNIQUESFORIMMOBILIZATION OFIMMUNOSPECIESANDTHEIRAPPLICATIONS INDEVELOPING IMMUNOSENSORS SHENGuo-Ii,YURu-qin (StateKeyLaboratoryofChemo/BiosenshtgandChenometnc,XollegeofChenu.tryand ChemicalEngineering,f-lunanUniversity.Changsha410082.China) (责任编辑 王龙杰 ) 基金项 目:国家自然科学基金资助项 目2〔0075008 作者简介沈国励(1938-).男教授.研究方向:化学与生物传感器.电话:0731-8822237;E-mail;创,,hen包1、二·edu