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亮白曲霉乳糖酶基因在毕赤酵母中的高效分泌表达及酶学性质研究
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张 伟 范云六 姚 斌
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（中国农业科学院 生物技术研究所 饲料研究所 北京 1$$$.1）
摘 要：将克隆的亮白曲霉（ ）乳糖酶基因 插入到毕赤酵母（ ）高效表达载体
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中，与分泌信号肽序列 因子融合，通过同源重组将 整合到酵母染色体上。通过 检测和表达
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产物的酶活性筛选，得到重组转化子，证明乳糖酶获得有效分泌和高效表达。表达的乳糖酶为糖蛋白，表观分子量
为 ，脱糖基后的蛋白分子量下降为 。经过 小罐高密度发酵，重组酵母中酶蛋白表达量为 发
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酵液，每毫升发酵液中乳糖酶的活力为0/$$R，高于目前国内外报道的水平。进一步研究了表达产物的酶学性质，
该酶最适 为 ，最适反应温度 ，比活性为 ， 为 ， 为 。与米曲霉
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的乳糖酶相比，该乳糖酶具热稳定性强、比活性高、 范围宽等特点。
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关键词：乳糖酶，毕赤酵母，高效表达，酶学性质
中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ）
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乳糖 酶 （ 半乳糖苷 酶， 到胞外，但也存在着菌体生长繁殖周期长、表达稳定
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F8’8BEY+’8X3， ）可将牛乳和乳制品中 性差、分离纯化困难等局限性。
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的主要糖成分———乳糖水解为半乳糖和葡萄糖，主 因此，寻求更加有效的表达系统高效分泌表达
要应用于生产营养成分更利于人体消化吸收的低乳 乳糖酶是提高
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