磺胺嘧啶单克隆抗体制备及其在免疫学检测中应用.pdf

摘要 被广泛用于畜牧业生产中。同时磺胺嘧啶药物具有诸多副作用，它可在动物体内残留，并通过动 物源性食品借食物链以低剂量传递，直接威胁到人类身体健康。 检测SD残留的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、联用技术、毛细管电泳法和免疫化 学测定法等。免疫学分析技术以其灵敏、特异、快速、简便等优点在药物残留检测领域已被广泛 应用。本研究内容主要包括SD人工抗原的合成：抗SD单克隆抗体(Monoclonal 制备；SD残留检测试剂盒研制和SD残留胶体金试纸研制等方面。 通过分析SD分子结构和免疫原性，采用重氮化法将SD偶联于牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵 疫小鼠后抗血清的ELISA鉴定，证明BSA—SD和OVA-SD偶联成功。 用BSA．SD免疫BALB／c小鼠后，应用细胞融合技术筛选出1株高亲和力、高特异性杂交瘤细 胞株(685．E4)。用体内诱生腹水法制各SDmAb。竞争ELISA测定其IC50为1．155 pg／L，与磺胺 甲基嘧啶(SMl)的交叉反应性为0．8％，与其它磺胺类同系物的交叉性均小于O．1％。 应用SD ug／L；试剂盒对尿样的平均回收率为118．5％：对奶样的平均回收率为81．05％；对肉样的平均回收 两种产品均具有快速、敏感、特异、简便等特点，适合于SD残留快速检测的推广应用。 关键词：磺胺嘧啶；单克隆抗体； ELISA试剂盒；胶体金试纸：残留 6 oFMoNoCLoNALANTIBoDIESAGAINST CHARACTERIZATIoN SULFADIAZINEANDITSAPPLICATIoNINIMMUNoASSAYFoR RESIDUESDETECTIoN Supervisor：Prof．NingChangshen Prof．ZhangGaiping Master Jifei candidate：Yang akindof antibacterial Wasused ABSTRACT：Sulfadiazine(SD)issynthetic medicine，and in fieldduetothevirtuesofwide convenience stockbreeding cost，and widely range，lower to humanhealthresidueinanimal’Sandtransferin use．It，simultaneously,threatsby body anima-derivedfoodsmeansoffood by cycle． detectionofSDresidueshavebeen suchas Manny assays developedhighperformance liquidchromatography(HPLC)，gas Electrophoresis(CE)andimmunochemistry．Theimmunologicalanalytical has meritsof and been convenience，has many sensitivity，specificity，rap