【论文】组织培养及其在实际生产中的应用.pdfVIP

l舭桃跳 2010．3工作研究 组织培养及其在实际生产中的应用 刘青会 (河北省保定市农业科学研究所 071000) 摘要：植物组织培养技术在提高农作物产量、培育农作物新品种等方面具有广阔的应用前景．因此 越来越受到各国科学家的重视。本文介绍了组织培养的产生、发展以及在生产中的应用。从细胞的 产生到试管培养再到现在的组织培养，无不加速 了生物技术的发展 。 关键词：组织培养；植物细胞；全能性；诱导 19世纪 3O年代 ，德 国植物学家施莱登 (M．J． 1．1 诱导细胞脱分化的外界条件 Schleiden，1804—1881)和德 国动 物 学 家 施 旺 (T． 1．1．1 细胞的脱分化 诱导细胞 的脱分化 ．需要许 Schwann，1810—1882)创立了细胞学说 ，根据这一学 多外界条件。任何一个分化的细胞都具有保持分生 说，如果给细胞提供和生物体 内一样 的条件 ，每个细 组织状态的潜势 ，不过它平常处于受抑制的状态 。消 胞都应该能够独立生活。 除抑制作用就可 以使细胞恢复分裂 。在各种外界条 1902年，德 国植物学家哈伯兰特(Haberlandt)在 件中，外源激素对脱分化起重要作用。 “适宜的NAA 细胞学说的基础上 。大胆提出要在试管中人工培育 用量 ，即可促进提早发根 ，可促进须根形成 ，从而提 植物 。他预言离体的植物细胞具有发育上的全能性 ， 高苗木的成活率 ”，如菊苣；有的仅需加入加细胞激 能够发育成为完整的植物体。这种细胞全能性理论 动素类 ，如大豆、萝 卜；另一类需加生长素和细胞激 是植物组织培养的理论基础。细胞的全能性即是每 动素类 ，如烟草髓 、胡萝 卜、马铃薯 ：还有一类不需加 个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传 任何激素，如冠瘿组织，烟草肿瘤组织。 基因，因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成 1．1．2 组织的分化与器官建成 早期研究发现 ，丁 一 个与母体一样 的植株 。这个概念虽然在本世纪初 香的芽可以诱导邻近的组织分化出维管束，后证明 已经提出，但在当时的技术条件下，在实践上并没做 这是芽中IAA的作用。将一块含有 14C—IAA和蔗糖 到。经过几十年来组织培养技术的不断改进 ，目前细 的琼胶楔形物插入到愈伤组织切 口中，14C—IAA表 胞 的全能性不但在理论上完全被证实 ，而且为组织 明蔗糖和 IAA通过琼胶扩散到愈伤组织 ，从而在愈 培养在实践上的应用奠定了基础。 伤组织中造成这两种物质的梯度 ，在楔形物一颇有 1 植物细胞 的全能性 同感形成维管束 的瘤状物 ，瘤状物含有一形成层带 ， 植物细胞要表现出全能性 ，须经过几个步骤 ：(1) 一 面形成韧皮部 ，一面形成木质部 ，与正常的维管束 成熟细胞一分生细胞一胚状体一完整植株。(2)成熟 有类似的排列。增加 IAA的浓度 ，导致木质部形成， 细胞一愈伤组织一出根出芽一完整植株。脱分化也就 增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。生长素水平恒定 是已经分化定型的细胞 ，经过诱导成为重新恢复了分 时，2％蔗糖则全部分化出木质部，4％蔗糖几乎全部 裂能力 (也就是成为分生状态)细胞的过程。 分化出韧皮部，3％蔗糖则可以分化出二者。所以，生 不但植物体细胞可以表现全能性，花粉在培养 长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数 条件下也可能进行脱分化，通过愈伤组织或胚状体 量、根和芽的分化。 发育成单倍体植株。“植物组织培养不仅包括在无菌 1．1_3 根的形成 根是组织培养 中易形成 的器官 ， 条件下利用人工培养基对植物组织进行培养 ，而且 早在 30年代 。就看到胡萝 卜培养物 中根 的形成 ，以 包括对胚胎、细胞、原生质体的培养 。” 后又在多种植物中看到．同一植物不同器官可以诱 一 98— 工作研究2010．3 舭辞技龇 JII 导出根来：如棉花幼苗子叶、下胚轴切段、油菜叶片、 种