DNA甲基化水平定量分析方法研究进展.pdfVIP

国际遗传学杂志2010年2月 1513第33卷 第 1期 IntJGenetFeb．15，2010，Vo1．33，No．1 · 综 述 · DNA甲基化水平定量分析方法研究进展 张敏 权力 张霆 摘【要】 DNA甲基化是基因表达的重要调控方式，在人类胚胎发育和肿瘤形成过程中发挥重要作 用，已成为科学界关注的前沿和热点之一。基因组DNA 甲基化分析方法较多，现代仪器分析的方法如 高效液相色谱一串联质谱(highperformanceliquidchromatography—tandemmassspectrometry，LC—MS／MS)等 具有分析速度快、选择性高和灵敏度高等优点，比传统的分析方法具有更广泛的应用前景。本文就基因 组DNA 甲基化的定量分析方法作一综述。 【关键词】 肿瘤；胚胎发育；DNA甲基化；定量分析；液相色谱一串联质谱 ThedeterminationtechnologiesofDNAmethylation ZHANGMin，QUANLi，ZHANGTing．(Molecular ImmunologyLab，CapitalIra~titateofPediatrics，PekingUniversity，Beijing100020，China) Correspondingauthor：ZHANG咒 ．E—mail：zhangtingcv@ yahoo．com．cn A【bstract】 DNAmethylationcontributestotheregulationofgeneexpressionandplaysanimportantrole inhumanembryonicdevelopmentandoncogenesis．Nowadays，thedeterminationofgenonficDNA methylation isbecominghottopicinmanyfieldsandalotofanalyticalmethodshavebeenrepofled．Comparedtotraditional methods，themodern instrumentalanalyses，suchashigh performanceliquidchromatography—tandem mass spectrometry (LC—MS／MS)，bringhugeapplicationpotentialsingenomieDNAmethylationanalysis，duetoits advantageofhighselection，highthroughoutandlow determinationlimits．Thedeterminationtechnologiesofge— nomicDNA methylationweresummarizedinthisreview． 【Keywords】 Tumoi； Embryonicdevelopment； DNAmethylation； Quantitativeanalysis； LC— MS／MS DNA 甲基化是指 甲基在 DNA 甲基转移酶 默区域的转录抑制作用减低，引起整合到基因组中 (DNAmethyhransferase，DNMTs)的作用下共价结合 的某些病毒DNA以及本应该沉默的印记基因和位 于DNA分子中胞嘧啶的第5位碳原子上 ，南此形成 于失活x染色体上的基因表达 ；基因组低甲基化 5甲基胞嘧啶(5-methyloytosine，5mC)的过程 ，通常 还可能影响到某些转座元件如 LINE一1和Alu的活 情况下被转移的甲基来 自s腺苷蛋氨酸 (s—adenosy 性，致使这些转座元件发生转录或者转座到基因组 lmethionine，SAM)。DNA 甲基化与基 因转录活性 的其他区域 ；基因组低 甲基化还可能通过诱导染 密切相关 ，会显著影响基因表达 ，在维持正常胚胎发 色体不稳定在癌症的发生 巾发挥作用 。小 鼠实 育、基因组印迹和基因组稳定等方面发挥重要作用 ， 验发现在肿瘤的发生过程中，基冈组 DNA的低