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· 44 · 哈尔滨医药2010年第30卷第 1期 · 技术与方法 · LightCycler~480实时荧光定量 PCR仪在献血者血液筛查中的应用 孙秋影 ，卢长春 ，魏 强 ，庞淑芬 (黑龙江省血液中心，黑龙江 哈尔滨 150056) [中图分类号] R457．1 [文献标识码】 B 学科分类代码 ：320．11 文章编码：1001—8131(2010)01—0044—01 输血相关传染病的预防和控制已经成为全社会关注的焦 应用PCR进行早期筛查主要是因为PCR的高灵敏和短的窗 点，新技术的引进是进一步提高血液安全性的重要一环。应用 口期 ，方法学能够互补 ，与酶免检测互补，可以避免亚型或免 PcR进行早期筛查主要是因为 PcR的高灵敏和短的窗口期。 疫沉寂引起的漏检。 核酸检测(NAT)是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称， 为迎接2009年在哈尔滨市召开的世界大学生冬季运动 灵敏度高，可检出标本中极微量的核酸，在病毒感染后数天即能 会，我站在2008年应用了核酸检测技术，为大冬会筛检部分 检出，可大大缩短病毒检测 “窗口期”，提高输血安全性。 全血及成分血 ，为我省输血事业的发展作出了贡献。目前全 我站应用 LC480系统进行的96或384个样本快速循环 国采供血机构的血液制品传染病指标 的检测主要是使用 扩增PCR反应。通过监测核酸扩增时的荧光 ，可对产生的 EL／SA方法，但受方法学的限制，其病毒检测 “窗511期”再缩 结果定量检测和同时进行分析。 短已经很难 ，通过引进病毒核酸检测技术 (NAT)，将会大大 LC480仪器是一种具有实时在线检测综合能力的快速 减少输血感染疾病的发生。卫生部也在讨论使用ELISA和 热循环仪。安装后能实施条件一致的PCR，例如 ，同时扩增 NAT两种方法对发往临床的血液制品进行检测。我站具有 和检测靶核酸。通过加入双链DNA特异性荧光染料或荧光 前瞻性，应用此技术，对推动和提高采供血机构的检测能力 基团标记的序列特异性寡核苷酸探针检测靶核酸。这两种 具有重要影响。 途径都能在扩增时测量PCR产物，为定量PCR的基础。 我站于2008年2月至2009年3月正式应用此项技术， 我站采用了HBV／HCV／HIV三联核酸检测试剂盒 (荧 开展了部分全血及成分血的病毒核酸筛查工作，并在世界大 光PCR)，应用DP1000上海科华生物工程有限公司的核酸 学生冬季运动会期间，作为供血单位。我站为大冬会储备的 提取仪，8人份血样混合提取核酸，应用 LightCycler~480实 血液制品全部经过核酸检测，使大冬会储备血液制品与北京 时荧光定量 PCR仪进行 HBV、HCV、HIV三联检测 ，LightCy- 奥运会的储备血液制品质量标准一致。通过为世界性运动 cler~480PCR仪基于实时荧光 PCR反应原理，能对靶核酸 赛事提供医疗保障，大大提高了我站的检测水平和能力。该 进行快速、准确的检测。该仪器灵敏准确 自动化程度高，操 技术的引进及应用有助于快速、准确的筛查出标本中极微量 作维护简单方便，可检出标本中极微量的病毒核酸，在病毒 的核酸，在病毒感染后数天即能检出，可大大缩短病毒检测 感染后数天即能检出，可大大缩短血液中病毒检测的 “窗口 “窗口期”，提高输血安全性，具有极好的社会效益。 期”，极大提高了血液制 品的安全的性，保证 了输血安全。 收稿 日期：20o9—09一O8 彩超诊断下肢深静脉血栓的临床价值 吕 敏 ，时 美 (山东