溶血磷脂酸对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制.pdfVIP

222 中国循环杂志 2013 年 6 月 第 28 卷 第 3 期（总第 181 期）Chinese Circulation Journal，June，2013，Vol. 28 No.3（Serial No.181） ·基础与实验研究· 溶血磷脂酸对心肌细胞缺氧 / 复氧损伤的保护作用及机制 * 杨晋静 , 陈海波 , 王宪云 , 范雪松 , 丛祥凤 , 陈曦 摘要 目的：探讨溶血磷脂酸 (LPA) 对心肌细胞缺氧 / 复氧诱导损伤的保护作用及机制。 方法：建立 H9c2 心肌细胞和原代乳鼠心肌细胞缺氧 / 复氧模型。实验分组 : 对照组：不做任何处理； 缺氧 / 复氧 组 (H/R 组 )：无血清培养的细胞在缺氧罐中缺氧 24 h 后，换含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养液在常氧条件下培养 3 h； LPA 预处理组 (H/R+LPA 组 ) 和 LPA3 受体特异激动剂（OMPT）预处理组 (H/R+OMPT 组 )：细胞分别用 LPA(1，10， 25 μM) 和 OMPT(1，5，10 μM) 处理 1 h 后，进行缺氧 / 复氧，复氧时不加 LPA 和 OMPT。台盼蓝染色和细胞活性试 剂盒检测细胞活力。流式细胞术检测凋亡细胞，Caspase-3/7 活性检测试剂盒分析 Caspase-3/7 活性，免疫印迹检测 凋亡相关蛋白包括裂解的 Caspase-3，Bcl-2 和 Bax 蛋白表达。 结果：与对照组相比，H/R 组的 H9c2 心肌细胞的活细胞数和细胞存活率均降低 (P 均 0.05)；早期凋亡细胞数 增加 (P 0.05)。与 H/R 组相比，H/R+LPA 组的心肌细胞活细胞数和细胞存活率增加 (P 均 0.05)，其中以 10 μM 浓 度的 LPA 作用最为明显。10 μM LPA 也提高了原代乳鼠心肌细胞存活率 (P 0.05)。H/R+LPA 组两个浓度 (LPA 1,10 μM) H9c2 心肌细胞的 Caspase-3/7 活性较 H/R 组显著降低 ( P 0.05)。同时，H/R+OMPT 组三个浓度较 H/R 组都减少 线粒体促凋亡 Bax 蛋白表达，增加了线粒体抗凋亡 Bcl-2 蛋白表达 (P 0.05 或 0.01)。 结论：LPA 可能通过激活 LPA3 受体，抑制线粒体依赖的细胞凋亡途径，保护缺氧 / 复氧诱导的心肌细胞损伤 , 为心肌缺血再灌注损伤的防治提供了新的理论依据。 关键词 溶血磷脂酸；缺氧 / 复氧；心肌细胞 The Protective Role With its Mechanism of Lysophosphatidic Acid on Hypoxia/Re-Oxygenation Induced Neonatal Rat’s H9c2 Cardiomyocyte Injury YANG Jin-jing, CHEN Hai-bo, WANG Xian-yun, FAN Xue-song, CONG Xiang-feng, CHEN Xi. State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Cardiovascular Institute and Fu Wai Hospital, CAMS and PUMC, Beijing (100037), China Corresponding Author: CHEN Xi, Email: chenxifw@126.com Abstract Objectives: To investigate the protective role with its mechanism of lysophosphatidic acid (LP